[发明专利]植物间基因组杂交亲和性的分析方法无效

专利信息
申请号: 97121000.4 申请日: 1997-12-09
公开(公告)号: CN1062310C 公开(公告)日: 2001-02-21
发明(设计)人: 赵民安;刘敏;李维琪 申请(专利权)人: 中国科学院新疆化学研究所
主分类号: C12N15/05 分类号: C12N15/05;C12N15/10;C12Q1/68;A01H1/02
代理公司: 中国科学院新疆专利事务所 代理人: 张莉
地址: 830011 新疆维*** 国省代码: 新疆;65
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摘要:
搜索关键词: 植物 基因组 杂交 亲和性 分析 方法
【权利要求书】:

1、一种植物间基因组杂交亲和性的分析方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:

a)、提取所需要改良植物的总DNA,并通过限制性内切酶及超声波处理,制备成0.1-5Kb的DNA片段,将该总DNA片段进行|3H|DNTP标记,制备成放射性探针。

b)、分别提取所需改良的植物的总DNA和外源基因植物的总DNA,其中所述的外源基因植物选自野生植物及其它基因源植物,将所述总DNA分别经限制性内切酶酶切,电泳,然后通过印迹方法分别转印到硝酸纤维素膜上;

c)、用制备的同位素探针和转印后的硝酸纤维素膜进行Southern杂交;

d)、根据杂交信号的相对强度确定植物间的亲和性。

2、根据权利要求1所述的植物间基因组杂交亲和性的分析方法,其特征在于,其中步骤d)的操作过程是通过放射自显影对每张杂交膜进行检查,将检查无污染斑点的杂交膜分别装入样品瓶中,在闪烁仪中测定其放射性强度,以转印有外源基因植物总DNA杂交膜的放射性强度占转印有所需改良的植物总DNA的杂交膜的放射性强度的百分数作为植物间的亲和性百分数。

3、根据权利要求2的植物间基因组杂交亲和性的分析方法,其中还包含一条相同面积的空白硝酸纤维素作为对照,计算亲和性百分数时分别减去对照杂交膜的放射性强度。

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