[发明专利]植物间基因组杂交亲和性的分析方法无效
申请号: | 97121000.4 | 申请日: | 1997-12-09 |
公开(公告)号: | CN1062310C | 公开(公告)日: | 2001-02-21 |
发明(设计)人: | 赵民安;刘敏;李维琪 | 申请(专利权)人: | 中国科学院新疆化学研究所 |
主分类号: | C12N15/05 | 分类号: | C12N15/05;C12N15/10;C12Q1/68;A01H1/02 |
代理公司: | 中国科学院新疆专利事务所 | 代理人: | 张莉 |
地址: | 830011 新疆维*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 植物 基因组 杂交 亲和性 分析 方法 | ||
1、一种植物间基因组杂交亲和性的分析方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
a)、提取所需要改良植物的总DNA,并通过限制性内切酶及超声波处理,制备成0.1-5Kb的DNA片段,将该总DNA片段进行|3H|DNTP标记,制备成放射性探针。
b)、分别提取所需改良的植物的总DNA和外源基因植物的总DNA,其中所述的外源基因植物选自野生植物及其它基因源植物,将所述总DNA分别经限制性内切酶酶切,电泳,然后通过印迹方法分别转印到硝酸纤维素膜上;
c)、用制备的同位素探针和转印后的硝酸纤维素膜进行Southern杂交;
d)、根据杂交信号的相对强度确定植物间的亲和性。
2、根据权利要求1所述的植物间基因组杂交亲和性的分析方法,其特征在于,其中步骤d)的操作过程是通过放射自显影对每张杂交膜进行检查,将检查无污染斑点的杂交膜分别装入样品瓶中,在闪烁仪中测定其放射性强度,以转印有外源基因植物总DNA杂交膜的放射性强度占转印有所需改良的植物总DNA的杂交膜的放射性强度的百分数作为植物间的亲和性百分数。
3、根据权利要求2的植物间基因组杂交亲和性的分析方法,其中还包含一条相同面积的空白硝酸纤维素作为对照,计算亲和性百分数时分别减去对照杂交膜的放射性强度。
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