[发明专利]用于马立克氏病毒疫苗生产的可传代细胞系的改进

权利要求书

1.在由鸡胚细胞(CEC)(为鸡辅助因子(CHf)阴性并不含病毒，用化学诱变剂处理，然后感染MDV)衍生的单层培养中可传代的感染马立克氏病毒的鸡细胞系，该细胞系能够体内感染鸟类，其中MDV可以以溶源性或非溶源性感染保留在细胞系内。

2.权利要求1的细胞系，其中MDV用来制备病毒疫苗，以在鸟类中产生免疫。

3.权利要求1或2中任何一项权利要求的细胞系，其中MDV是选自血清型1、血清型2或血清型3MDV的病毒，其中血清型3是火鸡疱疹病毒(HVT)。

4.权利要求1或2中任何一项权利要求的细胞系，其中MDV是包含插入MDV中的一个或多个位点的一个或多个外源基因的基因工程MDV。

5.权利要求1或2中任何一项权利要求的细胞系，其中MDV是包含一个或多个缺失MDV的区域的基因工程MDV。

6.权利要求1的细胞系，其中MDV选自火鸡疱疹病毒(HVT)菌株FC126-OCL(以细胞系ATCC CRL 12052保藏)和马立克氏病毒(MDV)菌株SB1-OCL(以细胞系ATCC CRL12053保藏)。

7.权利要求1、2或6中任何一项权利要求的细胞系，其中CEC为CHCC-OU2。

8.权利要求1、2或6中任何一项权利要求的细胞系，其中MDV可以通过细胞应激反应或sescenence再活化为非溶源性感染。

9.在非融合单层培养中生产被潜伏的马立克氏病毒(MDV)感染的可传代鸡细胞系的方法，包括：

(a)将鸡胚细胞(为鸡辅助因子(CHf)阴性、不含病毒并用化学诱变剂处理过)与MDV在培养基中混合，使得CEC感染MDV；

(b)从未感染的CEC中纯化感染MDV的CEC；

(c)繁殖感染MDV的CEC以在单层培养中生产细胞系，其中MDV可以以溶源性或非溶源性感染保留在细胞系内。

10.权利要求9的方法，其中MDV病毒选自由原代胚胎成纤维细胞衍生的与细胞相关的MDV病毒、无细胞MDV和转染到CEC的MDV DNA。

11.权利要求9或10中任何一项权利要求的方法，其中MDV是用来制备病毒疫苗以在鸟类中产生免疫的病毒。

12.权利要求9或10中任何一项权利要求的方法，其中MDV选自血清型1、血清型2或血清型3MDV的病毒，其中血清型3是火鸡疱疹病毒(HVT)。

13.权利要求9或10中任何一项权利要求的方法，其中MDV是包含插入MDV中的一个或多个位点的一个或多个外源基因的基因工程MDV。

14.权利要求9或10中任何一项权利要求的方法，其中MDV是包含一个或多个缺失的MDV基因的基因工程MDV。

15.权利要求9或10中任何一项权利要求的方法，其中MDV选自火鸡疱疹病毒(HVT)菌株FC126-OCL(以细胞系ATCC CRL 12052保藏)和马立克氏病毒(MDV)菌株SB1-OCL(以细胞系ATCC CRL 12053保藏)。

16.权利要求9或10中任何一项权利要求的方法，其中CEC为CHCC-OU2。

17.用马立克氏病毒(MDV)感染鸟类的方法，包括：

(a)提供由鸡胚细胞(为鸡辅助因子(CHf)阴性并不含病毒，用化学诱变剂处理，然后感染MDV)衍生的、作为单层培养保持的、感染马立克氏病毒的可传代鸡细胞系，其中MDV可以以溶源性或非溶源性感染保留在细胞系内，该细胞系能够体内感染鸟类；

(b)用疫苗接种鸟类。

18.权利要求17的方法，其中接种是通过注射或口服。

19.权利要求17或18中任何一项权利要求的方法，其中MDV是用来制备病毒疫苗以在鸟类中产生免疫的病毒。

20.权利要求17或18中任何一项权利要求的方法，其中MDV选自血清型1、血清型2或血清型3MDV的病毒，其中血清型3是火鸡疱疹病毒(HVT)。