[发明专利]新颖的鞘脂和其制备方法

说明书

本发明涉及鞘脂制备方法。而且，本发明的某些鞘脂具有大量已报道过的存在于海星细胞毒脑苷脂的稀有支链多不饱和鞘氨醇部份(见Kenneth L.Rinehart等人“Ophidi acerebrosides：Cytotoxic Glycosphingolipids Containing a Novel Sphingosine from a Sea Star”，J.Org.Chem.，1994(59)，第144-147页)。鞘氨醇和鞘脂对哺乳动物细胞产生很多作用(由S.Spiegel和S.Milstein论述，见J.Membrane Biol.146，225(1995))并用作蛋白激酶C的抑制剂(美国专利4,937,232)，因此，这些鞘氨醇和鞘脂对于和癌症、类风湿性关节炎、糖尿病并发症、中枢神经系统紊乱等的一些疾症具有药用价值。此外，鞘磷酸肌醇酯(inositol sphingophospholipids)和氨基乙基磷酸N-脂酰基鞘氨酯(ceramide aminoethylphosphonate)代表已被在卵菌亚纲的真菌上描述并证实生物活性的两类鞘脂。来自疫霉(Phytophthora capsici)的鞘磷酸肌醇酯对于胡椒作物具有保护作用以对抗由疫霉(P.capsici)引起的致病机理(见European Joural ofBiochemistry，1990(191)，第203-209页)。据报道来自疫霉(Phytophthora infestans)的氨基乙基磷酸N-脂酰基鞘氨酯能引发作物组织中植物抗毒素的聚积(见Physiologicai and Molecular PlantPathdogy，1986(28)，第215-225页)，该反应往往与激活抗病机理有关。本发明涉及的是以前没有记述过的新鞘脂。

本发明的制备鞘脂的方法是新颖的，并且比起从海星中分离那些鞘脂或通过繁多的全合成步骤(例如Richard R.Schmidt等人所述，见“Sphingosines-an Oxa-Cope Rearrangement Route for Their Synthesis”，Synthesis，第868-876页(1995年7月))来讲，明显要更方便。本发明用真菌作为所需鞘脂的方便的来源，优选卵菌亚纲真菌，分离所需的鞘脂后，如果需要，可将该鞘脂适宜地改性为子体鞘脂，从而在水解条件下，除去母体鞘脂的原来的首基和/或脂肪酸部分以制得N-脂酰基鞘氨醇或鞘氨醇磷酸乙醇胺(Sphingosinephosphorylethandamine)。然后，可使用本领域普通技术人员公知的技术将该母体鞘脂、N-脂酰基鞘氨醇或鞘氨醇磷酰基乙醇胺改性以制得各种鞘氨醇骨架的子体化合物。

根据F.K.Sparrow所著“The Present Status of Classification ofBiflagellate Fungi”(见John Wiley(纽约)出版，E.B.Gareth Jones所编的Recent Adrances in Aquatic Mycology的第213-222页(1976))，可将卵菌亚纲真菌下分为六个等级：Eurychasmales、水霉目、链壶菌目、霜霉目、Thranstochytrials和网粘菌目。

这些卵菌亚纲真菌可使用各种天然的或化学成分确定的，固体或液体的生成介质(例如O.K.Ribeiro在A.R.G-antner Verlag(德国瓦杜兹)出版的“A Source Book of the Genus Phytophthora”中所述的那些)来培养。那些天然介质的实例是V-8汁介质、利马豆介质、马铃薯葡萄糖介质、燕麦粒介质、豌豆汁介质、改性胡萝卜介质、红肾形豆粉介质、谷物粉介质、芸苔种子提取液介质和黑麦种子提取液介质。化学成分确定的介质的实例包括Ribeiro在同一参考文献中所述的那些(79-99页)。

本发明的实施方案之一是制备下式新鞘脂及其对映异构体和结构同分异构体的方法：

其中：

R^4a是C(O)R^8a；

R^8a是(C₁₃-C₂₃)烷基、(C₁₃-C₂₃)烯基或(C₁₃-C₂₃)多基，所有这些既可以是直链又可以是支链；

X是支链或直链的烷基、烯基或多烯基；该方法包括的步骤为

(i)培养合适的真菌，

(ii)从所述的真菌中收集菌丝体，和