[发明专利]利用单一微生物将可发酵碳源生物转化为1,3－丙二醇

权利要求书

1.一种生产1，3-丙二醇的生物转化方法，包括在合适的条件下，使一种碳底物与一种至少含有一个能表达脱水酶的基因的单一微生物接触。

2.一种生产1，3-丙二醇的生物转化方法，包括在合适的条件下，使甘油与一种至少含有一个能表达脱水酶的基因的单一微生物接触，这种微生物选自曲霉属、酵母属、接合酵母属、毕赤酵母属、克鲁维酵母属、假丝酵母属、汉逊酵母属、德巴利酵母属、毛霉属、球拟酵母属、甲基菌属、沙门氏菌属、芽孢杆菌属、链霉菌属和假单胞菌属。

3.权利要求1的方法，其中基因编码甘油脱水酶，并分离自克雷伯氏菌属、乳杆菌属、肠杆菌属、柠檬酸杆菌属、暗杆菌属、泥杆菌属和梭菌属。

4.权利要求1的方法，其中基因编码二醇脱水酶，并分离自克雷伯氏菌属和沙门氏菌属。

5.权利要求1的方法，其中脱水酶是一种甘油脱水酶或二醇脱水酶。

6.权利要求1的方法，其中微生物转化有至少一个编码dhaB1、dhaB2和dhaB3和/或dhaT的DNA片断，由此微生物表达活性的脱水酶。

7.权利要求1的方法，其中微生物选自柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、梭菌属、克雷伯氏菌属、气杆菌属、乳杆菌属、曲霉属、酵母属、接合酵母属、毕赤酵母属、克鲁维酵母属、假丝酵母属、汉逊酵母属、德巴利酵母属、毛霉属、球拟酵母属、甲基菌属、埃希氏菌属、沙门氏菌属、芽孢杆菌属、链霉菌属和假单胞菌属。

8.权利要求7的方法，其中微生物选自转化有一个编码甘油脱水酶的基因或一个编码二醇脱水酶的基因的重组微生物，或选自具有促进1，3-丙二醇产生的表型的突变微生物。

9.权利要求7的方法，其中微生物选自克雷伯氏菌属、肠杆菌属和柠檬酸杆菌属，或者是重组的埃希氏菌属。

10权利要求9的方法，其中微生物是重组的大肠杆菌。

11.权利要求8的方法，其中微生物选自链霉菌属、芽孢杆菌属、假单胞菌属、酵母属、曲霉属、乳杆菌属和毕赤酵母属的重组菌株，这些重组微生物转化有至少一个编码dhaB1、dhaB2和dhaB3和/或dhaT的DNA片断，由此微生物表达活性的脱水酶，而碳底物是一种单糖。

12.权利要求11的方法，其中微生物选自重组的啤酒酵母、枯草芽孢杆菌、巴斯德毕赤酵母和地衣芽孢杆菌，这些重组微生物转化有至少一个编码dhaB1、dhaB2和dhaB3和/或dhaT的DNA片断，由此微生物表达活性的脱水酶，而碳底物是一种单糖。

13.权利要求1或10的方法，其中微生物是含有一个来自肺炎克雷伯氏菌的甘油脱水酶基因的重组大肠杆菌。

14.权利要求1的方法，其中碳底物如果不是甘油或二羟基丙酮则至少含有一个碳原子。

15.权利要求14的方法，其中碳底物选自单糖、寡糖和多糖。

16.权利要求15的方法，其中碳底物是葡萄糖。

17.权利要求14的方法，其中碳底物是一种醇。

18.权利要求1的方法，并进一步包括在微生物与碳底物接触前，使微生物在一种培养基中生长。

19.用权利要求1或15的方法生产的1，3-丙二醇。

20.一种约35kb、分离自肺炎克雷伯氏菌的粘粒，该粘粒包含编码一种活性甘油脱水酶的DNA片断，其限制酶切图谱见图1的泳道1和2。

21.一种包含一个宿主微生物和权利要求20的粘粒的转化微生物。

22.权利要求21的转化微生物，其中宿主微生物是大肠杆菌，其ATCC登记号为69789。

23.一种包含一个宿主微生物、一个分离自肺炎克雷伯氏菌的第一DNA片断和至少一个分离自肺炎克雷伯氏菌的第二DNA片断的转化微生物，其中第一DNA片断编码活性甘油脱水酶，其限制酶切图谱为图1中泳道1和泳道2，第二DNA片断编码不是甘油脱水酶的一种活性功能蛋白。

24.一个重组的假单胞菌菌株，包含一个编码dhaB1、dhaB2和dhaB3以及dhaT的DNA片断，其ATCC登记号为55760。