[发明专利]分析设备与方法

说明书

本发明涉及一种分析设备，尤其是特别适用于灵敏快速检验诊断设备的合成一步放大分析系统；以及涉及分析方法和分析用成套用具。

在很广范围的应用中，例如在临床免疫测定中，日益使用一步快速检验系统；例如用于妊娠，性传染病，食物试验，细菌学感染，变态反应检测，兽医试验，环境控制，毒素，生物试剂等的检验中。然而在许多其他情况下，尤其在样品中待检测的物质浓度已经极低的情况下，来自当前快速检验中的信号的灵敏度不是以提供定性或定量的结果，例如检测唾液或血液中HIV抗体，其他病毒感染，或指示特殊疾病发作的尿或粪便中低含量的细菌。

一步分析最好是使用一种几乎不需要熟练操作的简单、便宜、可随意使用的设备。将样品置入该设备的操作是作为一个单独的步骤来实施的，最好不需要随后的洗涤或流体变更。用一种可见信号给出结果，这种信号容易读出，且不需要用仪器去做这件事情。

这种快速试验设备通常涉及一些颗粒，例如彩色乳胶、碳或金；正是这些颗粒负责生成最终信号。妊娠检验药箱是这类设备中的一个众所周知的实例，用此药箱检验尿中激素βHCG的含量。在这些设备中，跟用于βHCG的抗体结合的金或乳胶负责生成一个可见的信号。

在EP-B-176799和EP-B-291194中示出这种已知设备的一些实例。

为了直接生成一个可见信号，重要的是，负责生成该信号的颗粒是有一定尺寸的。在金颗粒的情况下，为了保证生成清晰可见的信号，颗粒尺寸应当大于10nm，最好大于40nm。然而，在这些快速一步检验的灵敏度方面，存在一些限制，使其实用性受到局限。

为了检测含量很低的分析物，要求快速诊断检验有更高的灵敏度。虽然唾液中分析物的浓度通常比血中分析物浓度低100倍，但常常优选非损伤性的取样法。

本发明提供一种高度灵敏的快速检测设备。

根据本发明提供的一种用于检测样品中是否存在一种分析物的分析设备，其中指示所述分析物是否存在的可见信号是在支持体上的检测部位产生的，具体特征在于：借助于在一个被标记的第一粘合剂与一个标记显影剂之间的信号加强反应，生成或加强所述的信号；其中第一粘合剂与标记显影剂被安排成：用一个单独的分析步骤，但用一种使第一粘合剂在标记显影剂的前头到达检测部位的顺序方式，送到检测部位。

尤其是，本发明提供一种包括下述部件的设备：

(a)一个多孔的元件；

(b)一个第一粘合剂，它专门粘合一个分析物，在一种进入检测区的液体的影响下可以穿过多孔元件，并且包含一种不可见的标记物；

(c)一个第二粘合剂，它或者用一种跟第一粘合剂互补的方式专门粘合所述分析物，或者同所述分析物竞争，用于粘合所述的第一粘合剂；并且它可在所述检测部位内固定；和

(d)标记显影剂，它可以在一种进入所述检测部位的液体的影响下，跟在所述第一粘合剂后面移动，所述的标记显影剂可使不可见的标记物变成可见。

在此所用的术语‘不可见标记物’指的是那些通常肉眼看不见的或仅是依稀可见的标记物，甚至在一个分析位置的俘获区或检测部位中被浓缩时亦如此。这类标记物的实例包括酶标记物或颗粒标记物，它们或者是收集的数量不足以提供良好的可见信号，或者是尺寸特别小，例如尺寸小于10nm；尺寸小于5nm是适宜的，最好是从1至2nm。

标记显影剂包括一种能够显影不可见标记物，使它变成可见，从而生成一个信号的试剂。显影剂的性质将取决于所用不可见标记物的性质。

例如，当不可见标记物是一种酶标记物时，标记显影剂可以包括二氨基联苯胺或其他已知酶显影剂。

当标记物包括一种颗粒标记物时，显影剂可以把物质淀积到这些颗粒上，使它们变成可见的。适宜的颗粒标记物包括能够被加强的金属标记物，例如金、银、硒或铂标记物；或者颗粒状乳胶标记物，只要它们涂上一层能够被加强的物质，例如酶或金属涂层即可。颗粒标记物包括一种颗粒金属标记物是比较可取的，而最可取的是包括一种颗粒金标记物。

当使用一种颗粒金属标记物时，适宜的显影剂包括一种银试剂，例如同氢醌之类的适宜显影液在一起的乳酸银，其实例如Holgate等人在《J.Hisotchem.Cytochem，31，938-944》中所描述的那样。在多孔部件的适当区域以干燥方式适宜地保持银试剂，它将在此保持到由穿过该区域流向检测部位的液体重新悬浮为止。