[发明专利]胞内劳森氏菌培养、抗该菌的疫苗和诊断试剂

权利要求书

1.一种培养胞内劳森氏菌的方法，其特征在于，包括步骤：在氧浓度低于约18％下孵育该细菌，以及在悬浮液中维持该细菌以培养该细菌。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该细菌处于以悬浮液维持的培养细胞中。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，还包括步骤：将一部分该细胞传代至新鲜细胞以增加胞内劳森氏菌细菌的产量。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，还包括步骤：收获至少一部分该细胞。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该胞内劳森氏菌细菌是从感染胞内劳森氏菌的动物获得的。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，该动物是猪。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该孵育在氧浓度为约0-8％下进行。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，该孵育在氧浓度为约0-3％下进行。

9.如权利要求2所述的方法，其特征在于，该培养细胞选自：HEp-2、Mc-Coys和IEC-18细胞。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，该McCoys和IEC-18细胞在微载体上孵育。

11.按权利要求1方法生长的胞内劳森氏菌细菌。

12.一种培养胞内劳森氏菌细菌的方法，其特征在于，包括步骤：

(1)用含有胞内劳森氏菌细菌的接种物接种培养细胞，从而使该细菌感染该细胞；和

(2)在约36-38℃和氧浓度为约0-8％下孵育该感染细胞，同时搅拌该感染细胞，从而培养胞内劳森氏菌，同时维持该细胞处于悬浮状态。

13.一种产生减毒胞内劳森氏菌菌株的方法，其特征在于，包括：获得用胞内劳森氏菌细菌感染的培养细胞，在氧浓度为约0-18％下孵育该感染细胞，搅拌该感染细胞，从而培养胞内劳森氏菌，同时维持该细胞处于悬浮状态，使至少一部分该培养细菌传代，收获至少一部分该培养的细菌，选择减菌株以提供减毒的胞内劳森氏菌细菌。

14.一种检测在生物样品中是否存在与胞内劳森氏菌特异反应的抗体的诊断测试方法，其特征在于，使用按权利要求1所述方法产生的胞内劳森氏菌细菌或该细菌的组份。

15.一种检测在生物样品中是否存在与胞内劳森氏菌特异反应的抗体的方法，其特征在于，包括步骤：获得用胞内劳森氏菌细菌感染的培养细胞，在氧浓度为约0-18％下孵育该感染细胞，搅拌该感染细胞，从而培养该胞内劳森氏菌并同时维持该细胞处于悬浮状态，收获至少一部分该培养的胞内劳森氏菌细菌，从动物获得生物样品，在存在于该生物样品中的抗体会与该胞内劳森氏菌细菌或其组份发生反应的条件下将该样品与收获的胞内劳森氏菌细菌或其组份进行接触，确定是否发生抗体-抗原反应，从而确定在该生物样品中是否存在针对胞内劳森氏菌的抗体。

16.一种用于在动物中诱导针对胞内劳森氏菌细菌的免疫应答的疫苗，其特征在于，含有减毒的胞内劳森氏菌细菌和药学上可接受的载体，其中该减毒菌株的数量能有效地产生免疫应答。

17.如权利要求16所述的疫苗，其特征在于，该减毒菌株是用权利要求13所述的方法产生的。

18.一种用于在动物中诱导针对胞内劳森氏菌细菌的免疫应答的疫苗，其特征在于，含有杀灭的胞内劳森氏菌细菌和药学上可接受的载体，其中该细菌是用权利要求1所述方法产生的并且其数量能有效地产生免疫应答。

19.如权利要求16或18所述的疫苗，其特征在于，该被胞内劳森氏菌感染的培养细胞是通过用胞内劳森氏菌感染动物的肠组织匀浆而制备的。

20.如权利要求16所述的疫苗，其特征在于，该减毒菌株是菌株N343NP40wk。

21.一种在动物中诱导针对胞内劳森氏菌细菌的免疫应答的方法，其特征在于，给动物施用免疫有效量的权利要求16或18所述的疫苗。

22.用权利要求13所述方法产生的减毒菌株。