[发明专利]治疗骨吸收病的SRCSH2特异性化合物的用途

说明书

哺乳动物的骨不断经历着骨重组，这是一个骨吸收和骨形成的动态过程。这些过程被特定的细胞类型介导：骨形成是破骨细胞介导的矿化骨沉积的结果，而骨吸收是破骨细胞介导的骨基质溶解的结果。许多骨病是由骨形成相对骨吸收的不平衡引起的。例如，骨质疏松症和佩吉特病等疾病是以骨基质的净丧失为特征的。因此，抑制骨吸收的药剂在治疗这类疾病方面是有用的。

激活的破骨细胞通过吸附到骨基质上，将蛋白酶、有机酸和质子分泌到在细胞膜和骨基质之间形成的密封区室中来再吸收骨。酸性环境和蛋白酶使得密封区室中的骨溶解到骨表面的嵴窝或腔中，当破骨细胞从骨上分离时，所述的嵴窝或腔是明显的。

许多多肽生长因子和激素通过信号转导途径调节其细胞效应。从这些配体的细胞表面受体到细胞内效应器的信号转导经常包括由调节蛋白酪氨酸激酶(PTK)和磷酸酶引起的特异性蛋白底物的磷酸化或去磷酸化。酪氨酸磷酸化可能是多细胞有机体中信号转导的主要的，或者甚至可能是唯一的标志。结合的受体和细胞内PTKS调节免疫系统细胞中的细胞增殖、细胞分化和信号传输过程。

异常蛋白酪氨酸激酶活性与许多疾病(例如，糖尿病、动脉粥样硬化、牛皮癣、脓毒性休克、骨丧失、贫血、多种癌和其它增殖性疾病)有关或被怀疑与这些疾病有关。因此，酪氨酸激酶和信号转导途径(所述激酶是该途径的一部分)是药物设计潜在的靶。综述性文章参见Levitzki et al.，Science 267 1782-1788(1995)。

许多包含信号转导途径的蛋白质以低的水平存在，并常常具有相反的活性。这些信号传输分子的性质允许细胞通过亚细胞定位和效应器并列以及平衡激活与抑制来控制转导，以便一个途径的小的变化能获得开关效应。

通过蛋白质-蛋白质相互作用经信号传输分子并列的转导复合物的形成被特异性停靠域序列基序介导。Src同源性2(SH2)域起着关键性的作用，所述域是约100个氨基酸的保守的非催化序列，该序列是在各种信号传输分子(例如非受体PTKs和激酶靶效应器分子)和致癌蛋白质中发现的。SH2域对在自磷酸化PTK受体或细胞内酪氨酸激酶中发现的短的含磷酸化酪氨酸的肽序列而言是高度特异性的。

已鉴别了约60种蛋白质，它们具有不同催化的或其它功能性区域，但共有保守的SH2域，即约100个氨基酸的保守序列。体内哪一种生理反应由这些SH2域中的每一种控制并不准确知道。而且，SH2域-配体/化合物相互作用是高度特异性的，以致配体/化合物结构的微小改变将明显改变配体/化合物结合到各种SH2域上的选择性。

SH2域的非选择性拮抗作用的结果可能是非常严重的。例如，尽管src SH2域、lck SH2域和fyn SH2域结构相似，在域之间具有高度的保守性，但src SH2域的拮抗作用在本发明中表现为导致骨吸收，而lck SH2域或fyn SH2域的拮抗作用诱导免疫抑制。在骨吸收病的长期治疗中，诱导免疫抑制是不希望的。

而且，在针对所有60种已知SH2域的结合研究中试验潜在的src SH2域拮抗剂是不实际的。目前没有与src SH2域选择性相互作用的已知化合物。

提供经拮抗src SH2域来治疗骨吸收病但可避免产生在非选择性的SH2域拮抗剂中观察到的副作用的方法和化合物是合乎需要的。

如本文所公开的，已经意外地发现可以通过针对SH2域子集的结合试验鉴别选择性的src SH2域拮抗剂，所述子集包括src SH2域、lck SH2域、fyn SH2域、SHPTP2 SH2域、p85域、Grb2 SH2域和hcp SH2域。

从下文所述的结合信息中，已经意外地发现对人srcSH2域特异性的化合物用于治疗骨吸收病是有效的，所述化合物(a)以比高于50倍该化合物结合到人lck SH2域和人fyn SH2域的结合亲和力更大的结合亲和力结合到人src SH2域，(b)以比低于50倍该化合物结合到这种src SH2域的结合亲和力更小的结合亲和力结合到人hcp SH2域、人Grb2 SH2域、人SH-PTP2 SH2域和人p85 SH2域。