[发明专利]半抗原标记的肽

权利要求书

1.产生半抗原标记肽的方法，其中

(a)在固相上由反应性侧支基团被保护基团阻断的氨基酸衍生物合成具有目标氨基酸序列的肽，选择伯氨侧支基团上的保护基团使得需要时可选择性地被裂解掉，

(b)除去保护基团以形成至少一个游离的伯氨基团，

(c)将半抗原-活性酯衍生物与肽上至少一个游离的伯氨基团相偶联，并且

(d)如果需要，将仍保留的保护基团裂解掉，半抗原选自甾醇、胆酸、性激素、类皮质激素、强心甾、强心甾糖甙、蟾蜍二烯内酯、甾类皂角甙元和甾类生物碱。

2.权利要求1的方法，其中半抗原选自强心甾和强心甾糖甙。

3.权利要求2的方法，其中半抗原选自异羟洋地黄毒甙元、洋地黄毒甙元、芰毒甙元、毒毛旋花甙元、地高辛、洋地黄毒甙、地托辛(ditoxin)和毒毛旋花甙K。

4.权利要求3的方法，其中用异羟洋地黄毒甙元或地高辛为半抗原。

5.权利要求1至4之一的方法，其中带有在特定反应条件下可定量除去的第一氨基侧链保护基团的氨基酸衍生物用于半抗原将要偶联的肽位置上，带有第二氨基侧链保护基团的氨基酸用于半抗原不偶联的肽位置上，在第一保护基团可被裂解掉的反应条件下，第二保护基团自身不会被裂解。

6.权利要求5的方法，其中使用酸不稳定性第一保护基团和酸稳定性第二保护基团。

7.权利要求1至6之一的方法，其中用N-羟基琥珀酰亚胺酯作为活性酯衍生物。

8.权利要求1至7之一的方法，其中合成的肽含有一个免疫活性表位区和一个至少有一个半抗原标记物偶联的间隔区。

9.权利要求8的方法，其中间隔区的长度为1到10个氨基酸。

10.权利要求8或9的方法，其中间隔区位于肽的氨基或/和羧基末端。

11.权利要求8至10之一的方法，其中间隔区含有带电荷或/和可形成氢键的氨基酸。

12.权利要求8至11之一的方法，其中间隔区的氨基酸选自甘氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、ε-氨基己酸、赖氨酸和具有NH₂-〔(CH₂)_n-O〕_x-CH₂-CH₂-COOH结构的化合物，其中的n是2或3，X是1到10。

13.权利要求1至12之一的方法，其中合成的肽含有来自HIVI、HIVII或HCV氨基酸序列的表位区。

14.权利要求13的方法，其中表位区选自下列HIVI、或HIVII的氨基酸序列或其长度至少为6个氨基酸的部分序列：

NNTRKSISIG  PGRAFYT                 (I)

NTTRSISIGP  GRAFYT                  (II)

IDIQEERRMR  IGPGMAWYS               (III)

QARILAVERY  LKDQQLLGIW  GASG        (IV)

LGIWGCSGKL  ICTTAVPWNA  SWS         (V)

KDQQLLGIWG  SSGKL                   (VI)

ALETLLQNQQ  LLSLW                   (VII)

LSLWGCKGKL  VCYTS                   (VIII)

WGIRQLRARL  LALETLLQN               (IX)和

QAQLNSWGCA  FRQVCHTTVP  WPNDSLT     (X)