[发明专利]新型蛋白质及其制备方法

权利要求书

1.具有如下特征的蛋白质：

(a)在还原和非还原条件下，在十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳中分子量为约15KD；

(b)对阳离子交换体和肝素具有强的亲和性；

(c)具有成骨细胞增殖活性；

(d)70℃加热处理10分钟，成骨细胞增殖活性降低，90℃加热处理10分钟则失活。

2.按权利要求1所述的蛋白质，其来源为人成纤维细胞。

3.按权利要求1或2所述的蛋白质，其N-末端氨基酸序列特定为序列表中序列号1。

4.按权利要求1或2所述的蛋白质，其N-末端氨基酸序列特定为序列表中序列号2。

5.一种cDNA，其特征在于编码特定为序列表中序列号9的氨基酸序列。

6.一种蛋白质，其特征在于全氨基酸序列特定为序列表中序列号9，并具有成骨细胞增殖活性。

7.一种蛋白质，其特征在于含有序列表中以序列号9特定的氨基酸序列作为部分序列，并具有成骨细胞增殖活性。

8.一种蛋白质，其特征在于与序列表中以序列号9特定的氨基酸序列具有80％以上同源性，并具有成骨细胞增殖活性。

9.一种cDNA，其特征在于编码与序列表中以序列号9特定的氨基酸序列有80％以上同源性并具有成骨细胞增殖活性的蛋白质的氨基酸序列。

10.具有如下特征的蛋白质的制备方法，

(a)在还原和非还原条件下，在十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳中分子量为约15KD；

(b)对阳离子交换体和肝素具有强的亲和性；

(c)具有成骨细胞增殖活性；

(d)70℃加热处理10分钟，成骨细胞增殖活性降低，90℃加热处理10分钟则失活，

该方法的特征在于：培养人成纤维细胞，将培养液作肝素柱层析处理，洗脱吸附部分，将此部分上阳离子交换柱，再用肝素层析柱处理。

11.按权利要求10所述的蛋白质的制备方法，其所得蛋白质为与序列表中以序列号9特定的氨基酸序列具有80％以上同源性，并具有成骨细胞增殖活性的蛋白质。

12.一种宿主细胞，其特征在于：用含有编码序列表中以序列号9特定的氨基酸序列或与其有80％以上同源性、具有成骨细胞增殖活性的蛋白质的氨基酸序列的cDNA的表达质粒转化。

13.按权利要求12所述的宿主细胞，其特征还在于是来自哺乳动物、细菌、酵母或昆虫的细胞。

14.按权利要求13所述的宿主细胞，其特征在于该宿主细胞为大肠杆菌。

15.按权利要求14所述的宿主细胞，其特征还在于大肠杆菌为pQE30-OGFII(保藏号FERM BP-5139)。

16.蛋白质的制备方法，其特征在于：用含有编码序列表中以序列号9特定的氨基酸序列或与其有80％以上同源性、具有成骨细胞增殖活性的蛋白质的氨基酸序列的cDNA的表达质粒转化宿主细胞，培养宿主细胞，从培养物中提取权利要求1、3、4、6、7和8记载的任一蛋白质。