[发明专利]漆酶反应的增强作用

说明书

本发明涉及酶的活化，更具体地说，本发明涉及能增强漆酶和相关酶活性的试剂。

本发明还涉及在漆酶以及增强剂存在下氧化底物的方法。更具体地说，本发明涉及在溶液中漂白染料的方法，涉及当几种织物在洗涤液中一起洗涤时能抑制织物染料由着色织物向另一织物转移的方法，涉及含木质素材料的漂白方法，特别是漂白纸张生产用纸浆的方法，涉及纸浆制造中的废水处理方法，以及涉及木质素或含木质素材料的酶聚合和/或改性的方法。

漆酶(E.C.1.10.3.2)是一种能催化底物(电子或氢质子)和氧的氧化作用的酶。已知这些酶可来自微生物、植物体或动物体，如真菌。它们是典型的铜蛋白，即其中含有一个或多个铜原子作可辅基。

现有人建议将漆酶用于例如纸张生产中纸浆的漂白，用于纸浆生产中废水的处理，用于洗涤剂漂白的改进，用于洗涤中抑制染料的转移，以及用于木质素的改性，例如用于刨花胶合板的生产。

由Boehringer Mannheim供应的化合物2,2’-连氮基-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸盐)，ABTS是发色底物，是常用的过氧化物酶和酚氧化酶试剂。这些酶可催化分别由过氧化氢和分子氧进行的ABTS氧化作用，得到绿兰色，此工艺可由光度分析控制。

已知当ABTS被漆酶(多酚氧化酶，EC 1.10.3.2)氧化时形成稳定的阳离子团，人们认为其作用为非酚木质素类化合物氧化作用的氧化还原介体(Bourbonnais R.和Paice M.G.,FEBS lctt,(1990),267,99-102)。

在ABTS存在下就漆酶对牛皮纸浆的去甲基作用和去木质作用进行研究表明在ABTS存在下漆酶的部分去甲基作用的程度提高了(Bourbonnais,R.and Paice,M.G；Microbiol.Biotechol.,(1992),36,823-827)。

已有报导说某些可氧化的底物如金属离子和酚类化合物如7-羟基香豆素(7HCm)、香草醛(VAN)和对羟基苯磺酸盐(PHBS)能增强漂白作用，可作为加速剂或增强子〔参见例如：WO 92/18683，WO 92/18687，以及Kato M和Shlmizu S,Plant cell Physiol.,1985,26(7),pp1291-130l(特别是表1)，或Sannders B.C.等人，Pcroxi-dase,London,1964,P141ff)。

现出人意料地发现由至少两上芳环组成的有机化合物能够增强漆酶的活性，在上述芳环中至少有一个环由一个或多个氮、氧和硫原子取代，并且所述芳环还可进一步稠合。

相应的，第一方面，本发明提供了增强漆酶活性的试剂，该试剂是由至少两个芳环组成的有机化合物，在所述芳环中至少有一个环由一个或多个氮、氧和硫原子取代；以及所述芳环可进一步的稠合。

就更具体的方面而言，本发明提供了增强漆酶活性的试剂，该试剂是通过Ⅰ的有机化合物：其中A表示单键或下述基团之一：(-CR¹¹=CR¹⁵-)_n、(-CR¹¹=N-N=CR¹⁵-)、(-NR¹¹-)、(-CR¹²=N-)n、(-NR¹¹-CR¹²=N-N=CR¹⁵-)、(-NR¹¹-CR¹²=N-)、(-CR¹²=N-NR¹¹)、(-NR¹¹-CR¹²=CR¹³-)、(-N=N-)，在上述基团中n表示1至6的整数；或者A表示碳、羰基、氮、硫、氧、硒或磷，其中碳、磷和氮可以是未取代的或是由取代基R¹¹的取代的；