[发明专利]从青脆枝中提取的生物碱及其应用和含该碱的组合物

说明书

本发明涉及从青脆枝(MAPPIA FOETIDA)中提取的新型生物碱及其在治疗上的应用以及含该生物碱的组合物。

本发明的生物碱具有以下结构式(I)：

氟艾替丁(foetidine)1：R＝H氟艾替丁2：R＝OCH₃。

通过用酸或碱，或用水解酶处理，氟艾替丁1和2可以分别定量地释出：在肿瘤学领域和治疗一些病毒疾病中是已知的生物碱—喜树碱或其衍生物，一种已在药理学上和临床上广泛试验的分子，或9-甲氧基喜树碱，其用于上述相同的症状。

式(II)的喜树碱，

与其它的化合物一起首次从喜树(Camptoteca acuminata)(珙桐科)和其中为青脆枝(Olinaceae)的其它的植物中分离出来；虽然对后者已研究了很长的时间，可是进一步的化学筛选却出乎意料地发现了这些新型的生物碱，甚至在加工该种植物的粗提取物时，也可以得到喜树碱。

在产生喜树碱的化合物中，特别重要的是氟艾替丁1，这是由于它在植物中的含量相当丰富。通过光谱分析和化学降解，对其结构式的阐明可以得到一种化合物的鉴定结果，其特征在于具有以香豆酸双酯化的亚精胺单元，该单元依次被开链的喜树碱单元酯化(参见式(I))。该化合物含于植物的各个部分，但尤以种子和根茎中为多，其含量为0.1-0.5％。与喜树碱相比，它的优点是在微酸性pH下易溶于水；相反，喜树碱在水中甚至在生物学上适用的所有载体中均完全不溶解，因此，从半合成的角度进行了充分的研究，以期消除这一缺陷。

氟艾替丁1是用低分子量的脂族醇或酮(单一的或在室温下与水的混合物)萃取植物的不同部分而得到的；将萃取液在低温和真空下浓缩，优选低于25℃；除去有机相，并用氯化的溶剂萃取浓缩水溶液，以提取含量极低的碱性生物碱，其中含有喜树碱、9—甲氧基喜树碱和mappicines；其后，用正丁醇或水不溶混的醇类萃取水相，随后，将其在低温和真空下浓缩至干。由丁醇萃取而得的残渣，在硅胶或类似的吸附剂上纯化，用作氯化溶剂的洗脱剂混合物，优选二氯甲烷，和脂族醇类，优选甲醇或乙醇。优选采用4∶1至1∶1的混合物。将本发明含有生物碱的部分合并、浓缩至干，残渣采用制备性HPLC，使用例如，LiClichrotrep RP8柱进一步纯化，并以甲醇/水之比从1∶1开始直到纯甲醇的甲醇/水洗脱梯度洗脱。含生物碱的部分在低温和真空下浓缩，并将浓缩的水溶液冷冻干燥。通过结晶而制得纯的生物碱。

将所得的化合物进行对人体肿瘤细胞系(卵巢、乳房、结肠、肺、对其它抗癌剂和类似的药剂是否有抗性)以及对某些病毒菌株的生物评价。事实上，已经知道喜树碱或它的一些较好的衍生物具有与抑制DNA拓扑异构酶I和II有关的细胞毒活性。

细胞毒性，例如对结肠癌细胞系约为25nM。氟艾替丁1的抗病毒活性，即使涉及菌株的不同耐药性，也可在1-100ng/ml的浓度下产生作用。氟艾替丁2在9-位上的甲氧基与氟艾替丁1的不同，但其作用类似。胞疹、细胞巨噬病毒和HIV病毒被证明对本发明的生物碱敏感。

本发明的化合物可以掺入各种药品的组合物中，但最重要的是在与血液相容的pH下，以水溶液的形式，很容易通过肠道外引入机体，而不致产生例如沉淀或不相容的问题。在该组合物中，所有传统的药用赋形剂均可采用。这些新型生物碱的剂量可为每次剂量和疗程为0.5-200mg。约50mg/m²的剂量被证明具有初步的疗效。

下列实施例将对本发明作详细说明，但对本发明的范围绝无限制。实施例1  从青脆枝的种子中制备氟艾替丁1