[发明专利]用于增强免疫功能的乳杆菌

说明书

本发明是关于免疫功能增强剂，其可以增加人体干扰素的产生并增强人体免疫功能。

干扰素(IFN)由多种细胞产生，如白细胞、成纤维细胞和T淋巴细胞，它在受病毒感染时产生并保护其它细胞不受病毒感染。因此，干扰素具有抑制病毒繁殖的作用。

几种干扰素中，据报道IFN-α的产量在患癌症、糖尿病、结核病等的病人中降低，产IFN-α的能力与对感染的敏感性成负性相关。

另外，还报道了IFN-γ的产量在癌症病人中降低，而在患桥本氏病和自身免疫病等的病人中产量增高。

还已知IFN-γ的产生对人体免疫功能的贡献不同于IFN-α的产生所反映的贡献。

因此，产生IFN-α和IFN-γ的能力被作为评价人体免疫功能的有用参数。

增强这些免疫功能被认为可改善免疫功能缺陷病人的一般状况和生活质量。

为了增强免疫功能，已建议服用IFN或使用强免疫增效剂如OK 432。

已知自然杀伤细胞(NK)活性与癌症病人状况相关，众所周知服用IFN可增强NK细胞的活性。

但是，重复使用IFN或免疫增效剂如OK 432发现会引起副作用。如内环境紊乱、发热和不适。

因此，不是服用IFN，而是发展了免疫功能增强剂，其可以提高人体内干扰素的产生并增强免疫功能。实际上，已建议双螺旋RNA、吡喃共聚物、阴离子高聚物和多种多糖(见日本专利公开No．Hei．3-9882)作为免疫功能增强剂。

但是，因为这些熟知的免疫功能增强剂不是人体中自然存在的，所以这些增强剂有毒性，当用来治疗感染或肿瘤时，在人体中可产生副作用。

本发明的一个目的是提供一种免疫功能增强剂，它可增加干扰素的产生并增强人体免疫功能。使用免疫功能增强剂可治疗或预防感染和肿瘤。

在这一点上，本发明人已发现了一种包括短乳杆菌凝结亚种(Lactobacillus brevis subsp．coagulans)CCTCC M94025菌粉的免疫功能增强剂。所述菌株系于1994年5月29日保藏于中国典型培养物保藏中心(中国湖北武汉大学校内)的，保藏号为CCTCC M94025。

短乳杆菌凝结亚种菌粉可用例如以下步骤产生：

首先，作为乳杆菌(Lactobacillus)来源的起始菌种在25-35℃、100rpm速度搅拌下在下述培养基A、B或C中培养18-40小时。

然后，浓缩或离心培养液，再冷冻干燥为短乳杆菌凝结亚种菌粉。培养基A

①酵母膏            0．5％

②葡萄糖            1．5％

③磷酸二氢钾        0．5％

④磷酸氢钠          2．0％

⑤氯化钠            0．425％

⑥氢氧化钠          0．0375％

⑦脱脂黄豆提取物    8．75％

⑧碳酸钙沉淀        0．1％培养基B

蛋白胨(polypeptone) 0．5-1．0％

酵母膏              0．5-1．0％

葡萄糖              0．5-1．0％

pH                  6．5-7．0培养基C

酵母膏              0．55％

葡萄糖              1．10％

蛋白胨              1．25％

磷酸二氢钠    0．025％

磷酸氢钠      0．025％

硫酸镁        0．01％

硫酸锰        0．0005％

pH            6．5-7．0

制备培养基A时，组分①-⑦加热下溶解在水中。然后，溶液中加入组分⑧后，调节溶液pH为6．8-7．0，再在121℃高压蒸气灭菌15分钟。另外，脱脂黄豆提取物用下述步骤制备：

脱脂后，将黄豆浸在稀盐酸(约0．25N)中，加入胃蛋白酶，然后混合物在不时搅拌下在37℃保持40-48小时消化。消化后，加入氢氧化钠中和此溶液。然后离心此溶液，取出上清液作为脱脂黄豆提取物。

起始菌种最好从食物如乳杆菌(Tsukemono)发酵的蔬菜中得到。每种培养基A、B和C 501产生100-500g细菌粉末，其中每g含20-500亿个细菌(2×10⁹-5×10¹⁰／g)。