[发明专利]一种用于测定液体中离子的方法和组合物

说明书

本申请是CN88102781.2的分案申请。原申请的申请日为1988年4月9日，发明名称为“测定液体中离子的方法”。

本发明涉及生物或非生物液体中的离子(下面称为分析物)测定的方法和试剂。

本发明的理论根据是许多分析物有激活或抑制敏感酶的作用。分析物可以是阳离子、阴离子、金属或非金属、单质或化合物。在实践中，经常发现样本中的分析物浓度超过相关分析指示酶的敏感性范围，或存在有其它离子对酶的敏感性产生干扰。本发明从多种途径提出并解决这些问题的方案。

在生物化学的临床实践中，血清电解质测量是医院里使用最普遍的分析方法。这些测量不论对于常规试验还是对于急诊，甚至对于生命处于危急中的状态(此时分析速度是极为重要的)都是必需的。由于医院里产生拖延的主要原因是要把样本从病房送到诊断实验室，因此，在紧急情况下，一种易于在床边进行的方法变得特别重要。

在生物化学的临床实践中，钾和钠的普通分析方法是火焰光度法。该方法的原理是，某些原子通过加热刺激被激发，当原子回到基态时则发出具有特征波长的光。火焰中由原子产生的特征波长辐射能的强度直接与火焰中激发原子的数量成正比，而原子数量直接与样本中所关心物质的浓度成正比。这种方法需要的装置复杂而且昂贵，并且要使用可燃气体。

另一种特别适于钠、钾和氯的方法是使用离子选择电极。理想的情况是，每个电极都具有单离子选择特性，使电极只对一种离子有反应。实际情况却不是这样，所有的离子选择电极都存在有干扰离子。况且，尽管能对离子特异性电极进行校正，但通常特异性仍不是绝对的。电极可测量由于特异离子的存在而产生的电位，但仪器比较昂贵。这两种方法都不能进行分光光度分析，因此临床上对于离子测定的需要，大大提高了市售可得的临床分析仪器的复杂性，其中大部分都是为分光光度法而设计的。两种方法都需要相当程度的技艺和知识才能成功地实施。

同样，用库仑法对氯离子进行常规测定需要特殊的仪器。此滴定过程的终点通过难溶氯化银产物的形成而增加的电流量确定。换句话说，可能利用的电位测定也是很费时间的，还需要另外的仪器设备。

另外，对于氯离子而言，有许多电位法和滴定法，例如其中包括：

通过二苯卡巴腙络合物滴定游离Hg²⁺

铁离子的硫氰酸盐络合物的比色测定，它是在由于HgCl₂的沉淀而发生的汞络合物的解离之后形成的(Skeggs，Clin.Chem.10，1964，918f.；Schmidt，Zentralblatt Pharm.124(9)，1985，527f)

用相应的汞盐(Benschler)比色测定氯冉酸

由无色汞盐比色测定二乙基二硫代氨基甲酸的Cu²⁺络合物(DE2137146)

颇为普遍的TPTZ法(tripyridile-s-triazine)(R.Fried，Zeitschr.Klin.Chem.，Elin.Bioch.10，1972，280f；DOS 215 3387)，它的基础也是随着汞络合物的解离而形成有色的金属络合物。

这些方法的主要缺点是使用了剧毒物质的溶液。有些方法复杂而不精确(如滴定法)。许多试剂不稳定，标定曲线不成直线(如硫氰酸盐法)。另外，为了避免试样中蛋白质含量的干扰，某些方法需进行预处理。

WO83/002670公开了一种改进的TPTZ法，但其不利之处是仍然使用了毒性汞化合物。唯一没有使用汞离子的比色法是在高氯酸溶液中测定Fe(III)的六氯络合物(F.Hoppe.，Ther.GgW.110(4)，1971，554f.；H.Mahner，Zeitschr.Klin.Chem.，Klin.Biochem.11(11)，1973，451f.；W.T.LaW，Clin.Chem.26(13)1980，1874f.；US4278440)。此方法最大的局限性是使用了侵蚀性的强酸试剂，因而不适于机械的吸管系统。另一不足之处是受到试样中胆红素的干扰。

钙是临床实验室中电解质测定的另一个例子。人体液中此金属离子的浓度被调控在很窄的范围内。病理上的高或低浓度都可能导致危及生命的紊乱，如肾功能不全、胰腺炎、痉挛和充血性心力衰竭。