[发明专利]乙型肝炎高度特异转移因子生产方法

说明书

本发明关于一种用于治疗乙型肝炎病毒感染的高度特异转移因子制造方法。

乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染包括慢性乙型肝炎与慢性HBV携带，这一疾病已经严重地威胁着人类的健康，机体感染了HBV之后，由于种种原因不能有效地清除HBV，呈现对HBV的免疫功能不足，或伴有出现“抗HBS-独特型抗体”(抗HBS-抗Id)这种自身免疫反应，呈现对HBV的免疫紊乱，机体对HBV的免疫功能障碍，导致成为HBV慢性感染。目前，国内外对HBV均缺乏特效抗病毒药，进而免疫调节治疗就显得非常重要。据文献报导，从慢乙肝肝硬化切下的脾提取的转移因子，称为乙型肝炎特异性转移因子(简称SSTF)，目前来说SSTF是治疗慢性乙肝临床疗效较好的药物之一。可惜这种脾脏来源极其有限。因为这个原因，有人考虑到具有很好免疫屏障功能的胎盘，用HBVM阳性胎盘提取一种多肽，称为胎盘特异转移因子(PSTF)或特异胎盘肽，用于治疗慢乙肝，临床疗效类似于SSTF，但对HBVM(乙型肝炎病毒标记物)的改善不如SSTF。应用转移因子(TF)是可以将一种主动免疫功能从一个个体移植到另一个个体上，但SSTF是从对HBV的免疫功能不正常的HBV慢性感染者身上提取的，把这种细胞免疫功能移植到另一个病人身上，可想而知是不会达到很理想的治疗效果。

本发明的目的就是要在当前还缺乏对HBV特效的抗病毒药的情况下，制造一种特效的药物，名称为乙型肝炎高度特异转移因子，帮助对HBV免疫功能能障碍的机体建立正常的免疫功能，达到消灭病人体内的HBV。

该高度特异转移因子系取用血浆表面抗体抗-HBs阳性者的人体血液，且该血液按卫生部颁布的《献血体格检查参考标准》要求取样得到，应用血细胞分离机分离出白细胞。按常规方法(例如按中国生物制品规程中规定的方法)提取得到的转移因子即为本发明制品，简称为HSTF。

此种方法生产得到的乙型肝炎高度特异性转移因子(HSTF)不仅具有一般转移因子(TF)的功能，且含对HBV特异的免疫功能，能用于HBV感染的治疗，对帮助HBV慢性感染者建立正常免疫状态起着决定性的作用。较SSTF而言，其治疗效果更为显著。实验证明，抗HBs阳性健康人之血。不仅对HBsAg有正常的体液免疫能力，而且其T细胞对HBsAg有相当强特异的细胞免疫功能，这功能是抗-HBS阴性健康人所没有的。

本发明实施方案如下：

首先培养筛选供血员，以达到卫生部84年颁布的《献血体格检查参考标准》要求的供血员为对象。最好按常规注射一个疗程的乙肝疫苗，并进行加强免疫后，三个月内抽取血液，该血浆呈抗HBS阳性者、其表面抗体滴度在1∶512以上为佳，上述血液经高速离心得白细胞层，加0.83％氯化铵离心分离得白细胞，洗涤白细胞(用生理盐水)，得到的白细胞其存活率最好大于90％，可用机械法或反复冻融法或两法交叉进行使白细胞破碎，白细胞溶解物经透析或超滤，再除菌过滤、分装、冻干即得具高度特异性转移因子成品(HSTF)，经测试表明：1.5ml的制品核糖含量125ug，多肽含量3.3mg，pH为6.7，紫外250nm＝13.6，260nm/280nm＝2.0，热原试验符合规定，安全试验和无菌试验也符合规定。