[发明专利]一种从双胸蚓中提取胶原酶的方法无效
| 申请号： | 92101406.6 | 申请日： | 1992-03-03 |
| 公开（公告）号： | CN1058750C | 公开（公告）日： | 2000-11-22 |
| 发明（设计）人： | 钟良玮;单鸿仁;张祖珣 | 申请（专利权）人： | 山西医科大学 |
| 主分类号： | C12N9/64 | 分类号： | C12N9/64 |
| 代理公司： | 太原专利事务所 | 代理人： | 闻秀之 |
| 地址： | 030001 *** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 双胸蚓中 提取 胶原酶 方法 | ||
【权利要求书】：
1、一种从双胸蚓中提取胶原酶的方法，包括冷冻制匀浆，抽提、盐析、脱盐和纯化工艺，其特征在于：
将排尽消化道内容物的双胸蚓冷冻后绞碎制成匀浆，用水或PH值为5-8的缓冲溶液抽提，用(NH4)2SO4盐析，沉淀对缓冲溶液透析或沉淀用少量的缓冲溶液溶解后进行凝胶过程或超滤脱盐，再加入核酸酶及透明质酸酶进一步消化，经胶原-聚丙烯酰胺凝胶亲和层析纯化产品或用DEAE-纤维素离子交换剂交换后，进行凝胶过滤或超滤纯化产品。
2、根据权利要求1所述的一种从双胸蚓中提取胶原酶的方法，其特征在于：所述的PH值为5-8的缓冲溶液为Tris-HCl缓冲溶液，浓度为0.005-0.15M，或乙酸缓冲溶液，浓度为0.005-0.1M或磷酸盐缓冲溶液，浓度为0.005-0.2M。
3、根据权利要求1或2所述的一种从双胸蚓中提取胶原酶的方法，其特征在于：所述的水或PH值为5-8的缓冲溶液中含有浓度为0.005-1.5M的钙、镁、钡或锰盐。
4、根据权利要求1所述的一种从双胸蚓中提取胶原酶的方法，其特征在于：用(NH4)2SO4盐析的饱和度为30-60％。
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