[发明专利]粒细胞菌落刺激因子的突变蛋白

权利要求书

1、粒细胞刺激因子(G-CSF)或G-CSF变异体，其中，有174氨基酸的成熟G-CSF的50到56位上的序列中或有177氨基酸的成熟G-CSF的53到59位上的序列的一个或几个氨基酸或/和有174个氨基酸的成熟G-CSF的43，79，156或170位点上或在有177个氨基酸的成熟G-CSF的46，82，159或173位点上的4个组氨酸残基中至少一个被诱变。

2、权利要求1所要求的G-CSF突变蛋白，其中，它在-1位含一个N-末端Met残基。

3、权利要求1或2所要求的G-CSF突变蛋白，其中序列Leu-Gly-His-Ser-Leu-Gly-Ile中的一个氨基酸被另外一个氨基酸取代。

4、权利要求1到3之一所要求的G-CSF突变蛋白，其中，有174个氨基酸的成熟G-CSF的53位或有177个氨基酸的成熟G-CSF的56位上的Ser残基被别的氨基酸取代。

5、权利要求4所要求的G-CSF突变蛋白，其中，其他的氨基酸是Thr。

6、权利要求1到3之一所要求的G-CSF突白蛋白，其中，在有174氨基酸的成熟G-CSF的54位上或在有177氨基酸的57位上的Leu残基被别的氨基酸取代。

7、权利要求6所要求的G-CSF突变蛋白，其中其他氨基酸是Thr。

8、权利要求1或2中所要求的G-CSF突变蛋白，其中，在有174氨基酸的成熟G-CSF的43，79，156或170位上或在有177氨基酸的成熟G-CSF的46，82，159或173位上的4个组氨酸残基中的一个被别的氨基酸取代。

9、权利要求8所要求的G-CSF突变蛋白，其中别的氨基酸是Gln。

10、重组DNA，其中，它编码了权利要求1到9中所要求的任一个G-CSF突变蛋白。

11、重组载体，其中它含有至少一个如权利要求10中所要求的重组DNA的拷贝。

12、权利要求11中所要求的重组载体，其中它适于在原核细胞中的基因表达。

13、细胞，其中它用如权利要求10中所要求的重组DNA或/和如权利要求11或12中所要求的重组载体转化。

14、权利要求13中所要求的细胞，其中它是原核细胞。

15、权利要求10所要求的重组DNA的生产方法，其中编码G-CSF或G-CSF变异体的DNA序列是被点特异诱变的。

16、权利要求15中所要求的方法，其中合成的寡核苷酸被用作诱变引物。

17、生产权利要求1到9中所要求的任一种具有G-CSF活性的蛋白质的方法，其中将一种细胞用一种权利要求10中所要求的重组DNA或权利要求11或12中所要求的重组载体转化，该转化细胞在合适的培养基中培养并将蛋白质从细胞或培养基中分离。

18、药物的制备方法，特征在于以权利要求1至9中所要求的任意一种或几种G-CSF作为活性物质，如果需要，加入常用的药用载体，填充剂和辅助物质。

19、将权利要求1到9之一中所要求的一种G-CSF突变蛋白用于免疫治疗。