[发明专利]由核酸直接生产核苷二磷酸的工艺

权利要求书

1、一种利用多核苷酸磷酸化酶(PNPase)对核酸进行磷酸解反应，生产核苷二磷酸的工艺方法。本发明的特征在于：用0.1-0.6Mol/L(PH8.2)的磷酸缓冲液，把核酸配成60-150g/L的溶液，并使溶液中含KClMol/L；MgCl₂0.01Mol/L，CuSO₄0.004Mol/L，脲0.3Mol/L，PNPase1000-3000单位/L，37±2℃反应34-48小时，结束反应后，分离浓缩、沉淀、干燥，即得成品。

2、根据权利要求1所述的工艺方法，其特征在于：核酸原料选用脱磷脱脂二级结构的核酸。

3、根据权利要求1.2所述的工艺方法，其特征在于，分离方法是按每克树脂吸附4-5克核酸的比例，把反应液直接上国产D₂₉₆大孔阴离子交换树脂柱，选用0.02Mol/L/的甲酸洗脱CDP，再用0.15Mol/L的甲酸洗脱ADP，用0.01Mol/L甲酸-0.05Mol/L甲酸钠溶液洗脱UDP，最后用0.1Mol/L甲酸-0.Mol/L甲酸钠溶液洗脱GDP。

4、根据权利要求3所述的工艺方法，其特征在于，浓缩的方法是把洗脱下来的四种核苷二磷酸溶液，分别调PH至4.5-5.0，按每克树脂吸附3克核苷二磷酸的比例上国产D_001-cc大孔阴离子交换树脂柱，用0.05N盐酸洗脱。