[发明专利]新的多肽、能表达它们的DNA序列、制备方法和应用

权利要求书

1、编码具对映选择酰胺酶活性的多肽的DNA序列。

2、根据权利要求1的DNA序列，其特征在于它们选自：

-示于图8的编码短杆细菌（Brevibacterium）R312对映选择酰胺酶的序列和示于图13的编码红球菌（Rhodo-coccus）的对映选择酰胺酶的序列，

-编码相同蛋白质的一些类似序列，但其来源于基因密码的简并，

-用一个该序列或其片断杂交并编码具有对映选择酰胺酶活性多肽的DNA。

3、根据权利要求1的DNA序列，其特征在于它至少包括示于图13的编码氨基酸137至193的序列，或示于图8的编码氨基酸159至215的氨基酸，或与这些序列有至少50%同源性的肽序列。

4、至少含有示于图8的序列编码位区的DNA。

5、至少含有示于图13的序列编码位区的DNA。

6、含有根据权利要求1～5任何一项的DNA序列的基因。

7、根据权利要求1～6任何一项中的DNA序列的表达所得的新的多肽，该多肽具有对映选择酰胺酶的活性。

8、根据权利要求7的多肽，其特征在于示于图8和图13的序列。

9、具有对映选择酰胺酶活性的多肽，且具有至少选自下述的序列。

-图13中相应的氨基酸137至193序列，

-图8中相应的氨基酸159至215序列，

-与前述序列至少具有50%同源性的序列。

10、根据权利要求7～9的任何一项的多肽，其特征在于它们不是自然起源的。

11、转化微生物它含有至少载有根据权利要求1～6任何一项序列的表达盒，在DNA序列的控制下，保证这些序列在宿主生物中的表达。

12、根据权利要求11的微生物，其特征在于保证根据权利要求1～6中之一项的序列表达的DNA序列含转录和转译起始区。

13、根据权利要求11的微生物，其特征在于转录和转译起始位区含有启动子序列和核蛋白体结合位点。

14、根据权利要求13的微生物，其中启动子序列和核蛋白体结合位点，根据产生的肽可以是同源的或异源的。

15、根据权利要求14的微生物，其特征在于启动子序列可以选自下述的棒状细菌噬菌体的强启动子，色氨酸操纵子的启动子Ptrp紫胶操纵子的启动子Plac，λ噬菌体的左启动子PL₁或λ噬菌体的右启动子PR。

16、根据权利要求15的微生物，其中，启动子选自色氨酸操纵子的启动子Ptrp和λ噬菌体的右启动子P_RCIts。

17、根据权利要求11的微生物，其中，核蛋白体结合位点，源自λ噬菌体的CⅡ基因，或棒状细菌的同源基因。

18、根据权利要求11至17之一项的微生物，其特征在于表达盒携带于带有选择性手段的质粒上。

19、根据权利要求11的微生物，其中选择手段是具有对抗生素有抗性的精心挑选的标记。

20、根据权利要求11的微生物，其特征在于质粒含有色氨酸操纵子的启动子Ptrp，删除了转录末端序列tR₁的λ噬菌体基因CⅡ的核蛋白体结合位点，编码短杆细菌（Brevibacterium）R312的对映选择酰胺酶基因的DNA和具有氨苄青霉素抗性的基因。

21、根据权利要求11的微生物，其特征在于质粒含有温度敏感的λ噬菌体P_RCIts右启动子，删除了转录末端序列tR₁的λ噬菌体CⅡ基因的核蛋白体结合的位点，编码短杆细菌（Brevibacterium）R312的对映选择酰胺酶基因的DNA和具有氨苄青霉素抗性的基因。

22、根据权利要求11至21之一项的微生物，其特征在于它选自下述的大肠杆菌（E.coli），短杆细菌（Brevibacterium），棒状杆菌（Corynehacterium），红球菌（Rhodococcus）菌株。