[发明专利]生产乙肝病毒的经修饰的L蛋白的方法无效
| 申请号： | 90107172.2 | 申请日： | 1990-07-25 |
| 公开（公告）号： | CN1080304C | 公开（公告）日： | 2002-03-06 |
| 发明（设计）人： | 马丁·康伯巴哈;奈杰尔·哈福德;特里萨·卡贝肖;阿波隆尼亚·拉特格斯;皮埃尔·沃埃特;艾力克·雅各布斯;科尼利斯·Ｐ·霍林堡;兹比纽·Ａ·亚诺维兹;阿明·Ｊ·默凯尔巴哈 | 申请（专利权）人： | 史密丝克莱恩生物公司 |
| 主分类号： | C12N15/51 | 分类号： | C12N15/51;C12N15/81;C12N1/16;C12P21/00;A61K38/00;A61K39/29;A61K9/16 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 姜建成,曹恒兴 |
| 地址： | 比利时*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 生产 乙肝病毒 修饰 蛋白 方法 | ||
1.一种生产乙肝病毒的经修饰的L蛋白的方法，所述蛋白的氨基酸序列由乙肝病毒的ad或ay亚型的L蛋白的部分氨基酸序列组成，其特征在于该蛋白的氨基酸序列或者由(a)所述L蛋白的残基12-52，后面是残基133-145，后面是残基175-400组成；或者由(b)所述L蛋白的残基12，后面是残基14-52，后面是残基133-145，后面是残基175-400组成；所述方法包括：(i)制备含有编码所述蛋白，并与调控序列可操作相连的DNA序列的表达载体；(ii)用该载体转化选自酵母细胞的宿主细胞；(iii)在合适的培养基中培养该宿主细胞，从细胞裂解液中或所述培养基的提取物中分离所述蛋白。
2.根据权利要求1的方法，其中宿主细胞选自酵母属、汉逊酵母属、毕赤酵母属、假丝酵母属、Kluyveromyces和裂殖酵母属。
3.根据权利要求2的方法，其中宿主细胞选自啤酒酵母和多形汉逊酵母。
4.根据权利要求1-3中任一项的方法，其中经修饰的L蛋白以颗粒的形式表达，并同时表达乙肝表面抗原的S蛋白，该方法包括培养一种还用能够表达所述S蛋白的DNA重组载体进行了转化的酵母细胞，并从细胞裂解液或提取物中分离混合亚基组成的蛋白颗粒。
5.根据权利要求4的方法，其中具有混合亚基组成的颗粒具有(L*，S)式，其中L*是指乙肝病毒的经修饰的L蛋白，其氨基酸序列包括L蛋白的残基12-52，后面是残基133-145，后面是残基175-400，而S是指乙肝表面抗原的S蛋白。
6.根据权利要求4或权利要求5的方法，其中S蛋白是ad亚型的，而经修饰的L蛋白是ay亚型的，或者相反。
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