[发明专利]一种由藤黄属龙葵植物(G.M.D.)树脂精制纯化可溶解细胞的化合物(GMD1630)之方法

说明书

本发明案系有关精制有用于溶解细胞的材料及制癌治疗方面之潜力的应用。更精确的言之，本发明系与由一系列萃取操作制备而得的新潜力性细胞毒药剂有关。此一精制过程业已制出一供机构侦测及药力增强的临床试验。

多种化合物业经用以侦测实验性的动物及若干种被证实在人类赘瘤的临床治疗上相当有效，且在可接受的毒性程度上提供化学疗法的指示。多种防止赘瘤之医药品业经妥善研究。此包括烷基化剂，抗新陈代谢剂，天然产品，不同药剂的医药品，荷尔蒙及拮抗剂，与放射性同位素。

不仅了解肿瘤形成之一般情形，且亦及肿瘤之异质性，而由此业已发现许多种扩癌药物。三十年前对人体赘瘤用化学疗法曾达成若干显著性舒减的结果，且第一个示例指示妇女之绒毛膜癌可用methotrexate治疗法治愈。今日，若干赘瘤性疾病若被治疗以药物或其他用药程式之药物时，被发现毋需缩减寿命。此等疾病包括妇女绒毛膜癌;儿童之急性白血病，威耳姆士氏（Wilm′s）瘤，尤汶士（Ewing′s）瘤，横纹肌肉瘤（rhabdomyosarcoma）及视网膜胚细胞瘤（retinoblastoma）;霍奇金氏（Hodgkin′s  disease），全体性组织细胞的淋巴瘤，蒲启特氏（Burkitt′s）淋巴瘤，覃样徵菌病及睾丸癌瘤。虽然此种令人印象深刻的结果，吾人深信人类癌症之多种最通常形式仍能抵抗有效的化学疗法。

为肿瘤行为而作之基础机构有关之基本的资料亦继续提出。在为发现新的有用的化学治疗药剂及设计出更有效的摄生法加上较少毒性方面的努力在最近十年业已获致最大的进步。

有许多种与用于“肿块消退”目的有关之中国草药的应用有关的古老报告。此名词“肿块消退”并不全然正确，由于肿块可能起因于炎症，肿瘤肿块或若干其他原因。欲以近代医学名词区分出目标疾病乃属重要的。若吾人甚至能由草药粗材精制出有效成分时，在研究及应用方面将更有用的。在中国，G.M.D.植物树脂曾被报导可用作治疗痈之类似抗生药物质。多种包括摩耳林（morellin），morellic  acid，lavone之morell，属藤黄科的α或β-guttiferin之化合物可由其萃取物分离出。其中多种被报导具有抗葡萄球菌的功效。然而仅少数被知悉有关其毒性，且亦无如本发明案所述之溶解细胞的功效。

为设计一方便且灵敏的侦测方法，由多种细胞系中之一种被选择出。此一具有迅速的成长率之细胞系为哺乳动物类细胞提供一无穷尽的来源。且CE细胞在加入毒素后二小时内显示出迅速的溶解反应。在活体内应用时连同此方法之其他两个鉴定方法亦被使用以侦测其生物学上的功效及监视中毒现象。

本发明提供若干可获取有溶解细胞的性质之有效成分GMD  1630之若干萃取操作。此萃取操作系被设计成适于自G.M.D.植物树脂块中以高产率快速的收集有效成分GMD  1630。在此操作中许多不需要的成分可被去除，且经精制的材料亦由多种不同的有机溶剂消毒。本发明案亦提供若干能侦测出GMD  1630存在之药力鉴别法。此于侦测中毒机构方面乃属重要的，且在监视活体内浓度方面非常有用的。

萃取操作系在精制纯化方面以一弹性方式被设计出，在此有实施此等不同的萃取操作之所有有效的最适顺序。二种主要的建议方式，亦即一为使用绝对酒精，另一为使用氯仿当作二溶剂系已被应用，且可将之结合以得高产率及良好的精制纯化度。

至于酒精萃取系统方面，树脂块（由草药铺或由作为干燥的植物萃取物之天然来源取得）系被辗碎成粉末。此粉末则被浸以绝对酒精，且在室温下被培养至经萃取的材料达到饱和为止（于OD363中以较长时间培养并无变化）。此一酒精萃取物（AE）被以蒸馏水稀释3至10倍。此混合物立即转变成云雾状，且GMD在以5000xg之离心力离心10分钟后可被发现有沉淀物。以酒精及水溶剂系统反覆的溶解化及精制纯化操作被发现可收集到精制的GMD  1630。实际操作上，20至30gm  GMD树脂块系在20℃-75℃之300-500ml绝对酒精中4-6小时被萃取而而得。渣被去除且溶液在5000xg离心力下被离心以消除任何颗粒。自绝对酒精中再沉淀出有效成分，蒸馏水被加入以稀释100%酒精至30-40%。溶液立即转变成浑浊状，且有效成分GMD1630在离心后被收集于锭状薄片中以供测IR用。