[发明专利]去除人血白蛋白制品中污染热原的工艺

说明书

本发明属于处理血液生物制品的工艺，具体说是一种去除人血白蛋白（HSA）制品中污染热原的工艺。

热原质普遍存在于自然环境中，若血液制品污染了一定量的热原，就会发生热原反应，据资料统计，临床上输液或输血过程中产生的发热反应，多数是由于污染了革兰氏阴性细菌的内毒素所致，它是一种具有代表性的细菌性热原质。为了消除HSA制品中的污染热原，人们一直都在寻求合理的解决途径，目前常用的传统处理蛋白制品热原方法有：碱处理、酸沉淀-辛酸钠加温、氢氧化铝吸附法、活性碳吸附法、Rivanol重制、稀释法等，这些方法均存在处理规模小、蛋白制品损失量大、合格率低、技术和条件要求高等缺点。如碱处理方法主要对HSA热原试验不合格的边缘或平均升温不太高的制品有效，但对ΣT高、XT复杂的制品无效;酸沉淀-辛酸钠加温可用于ΣT高、XT复杂的制品，但再次处理后损失量大，操作环节多，再污染率高，合格率低;氢氧化铝吸附法被认为是径典、有效的传统方法，但配制该吸附剂和解脱液的技术、条件要求高，重复性差，损失量大，铝离子毒性增加，对制品的性质有影响，仅适宜小批量处理;Rivanol重制是Rivanol法生产HSA制品工艺流程中的某一步重复操作，尽管有效，但只适用于单批量的再制处理，损失量大，钠离子升高显著，有聚合现象。由于上述处理方法的缺陷，就目前的消除热原来讲，仍然是把重点放在严格生产过程，把握质量关的预防措施上，对已污染了热原的制品则用于培养液或倒掉，给社会和人民造成了极大的损失。

本发明的目的就是要提供一种能有效去除人血白蛋白制品中污染热原，确保制品合格率，并适合大规模工业化生产和处理的工艺方法。

本发明是在总结诸常规方法的基础上，根据细菌内毒素热原质的主要性质，以理化手段，去除和破坏热原质的毒性中心结构（LPS），从而消除人血白蛋白制品中污染热原的致热毒性。

本发明工艺的设计原则是：在保证消除制品中污染热原的前提下，具有合理的纯度和回收率，并且不加入任何危及人身安全的有害物质，尽可能完整地保留HSA原有的理化和生物学性质。

本发明工艺过程为：将热原不合格或其它质检指标不合格的人血白蛋白制品大批量混合，测出或计算出混合量的蛋白浓度，加蒸馏水稀释至蛋白浓度为5%～10%，最佳范围为5%～9%，用5%的碳酸氢钠调PH至9～10，最佳范围为PH9.4±0.2，按1∶1加入8%的Rivanol（白蛋白综合物），滴加搅拌，静置，静置时间最好为2小时，刮沉淀，弃上清，在沉淀中加入酸性解脱液，酸性解脱液可由0.85%NaCl、0.1%辛酸钠、0.5NHCl和2/3蒸馏水混合制成，调PH至10～11，最佳范围为PH10.40±0.2，静置，静置时间最好是8小时，澄清，除菌，质检完成。

本发明工艺既可以作为处理己污染热原的人血白蛋白制品的独立工艺，又可作为一部分工艺步骤穿插入人血白蛋白制品的生产工艺过程中，以确保人血白蛋白制品生产合格率。

该工艺从试验摸索到稳定形成，仅在半年时间里，利用现有的生产条件和设备，对污染了热原的人血白蛋白制品进行处理，得到合格的制品为603311.414克，创值102.5294万元。

通过机理分析和实践证明，本发明工艺具有确保人血白蛋白制品合格率，处理后的制品损失量小、纯度高、热原低、并有解聚作用及所得合格制品理化、生物学性质不变、安全和毒性试验合格的优点;该工艺投资少、成本低、处理周期短，在热原处理规模上，以及最大限度地消除ΣT高、XT复杂的热原质等方面，取得了突破性进展，并首次证实了在HSA制品中存在冷原质的可能性。

实施例1（试验摸索例）：89年1月28日

1000ml不合格HSA半成品（ΣT2.55，XT0.85;Pr9.87%）

1、加蒸馏水500ml

2、用5％碳酸氢钠调PH至9.56（约15.7ml)

3、按1：1加8％Rivanol(即：1500ml蒸馏水＋

12g Rivanol)

4、静置Zhr（上午11：00－下午1：10）

刮沉淀、弃上清

 1、加入酸性解脱液（即：蒸馏水2000ml

                    NaCl   17g

                    辛酸钠    2g

                     0.5NHCl(调至PH5.4±0.2)

 2、静置过夜

澄清

 1、加活性碳50g