[发明专利]具有抗体活性和广谱作用的产品，由它们组成的或含有它们的药物，应用它们治疗与细菌或毒素有关的疾病、应用它们杀灭原虫

说明书

本发明是关于免疫球蛋白产品，该免疫球蛋白产品具有较高的抗体活性，它可通过已知方法从非（人工主动）免疫的哺乳动物的初乳中获得。而且，本发明涉及含有该产品或由它组成的药物，以及应用它们治疗与细菌或毒素有关的疾病，特别是与艾滋病（AIDS）或其它免疫缺陷病有关的腹泻、旅行者腹泻和婴儿中毒性腹泻、胃和肠溃疡、慢性和急性耶尔森氏菌属感染，以及杀灭原虫等。

免疫球蛋白是一组具有高活性同时又很敏感的蛋白质，特别适于细菌和病毒病的预防和治疗。如果合适，可以应用特定的组合物形式对抗某些毒素。它们可以通过较精细的方法从人血浆中制得，或以更直接的方式从哺乳动物的乳或初乳中获得。

从人血浆得到的免疫球蛋白包括，如免疫球蛋白G，这种免疫球蛋白对于多种感染的预防和治疗是有效的。

已知的从乳或初乳中制得的含有免疫球蛋白的产物纯度稍低于由人血浆制取的产品。它们主要用作兽药治疗传染性疾病。

从乳或初乳中制取免疫球蛋白的许多方法至今已经公开。

例如，美国专利4，526，715介绍了一种从乳中通过几种层析分离步骤制备免疫球蛋白的方法。

美国专利3，128，230涉及从乳中制备可用于治疗各种细菌感染的产品方法。

美国专利4，265，925和美国专利1，573，995叙述了从乳血清中制备蛋白质浓缩物的方法，因为有热处理过程，经常引起较重的蛋白质变性。

最后，西德专利2，813，284和欧洲专利EP-A    0，046，909及EP-A    0，064，103叙述了从初乳中制备含免疫球蛋白产品的方法，该产品可作为抗感染药物。

按上述方法，开始从乳或从经过超免疫的哺乳动物（特别是牛）的初乳中制备有药效的免疫球蛋白产品。为了达到抗致病菌或抗致病病毒的效果，开始必须给动物注射一株或多株细菌，或它的抗原，以便能够产生一种抗体或一组特异性抗体。

用该方法获得的产物的活性与所应用（免疫）的细菌型别和数量有关。

为了能从乳中制备具有特异抗体活性的产物（例如抗细菌抗原），开始也得对动物用特异性抗原进行免疫。如此获得的乳才含有抗特异抗原的高滴度的抗体，该乳起到载体介质作用。

本发明的目的是通过一个简单和经济的方法制备具有高纯度和高抗体活性的免疫球蛋白产品，而且预先无需进行超免疫过程。它可用于人和用作兽药。

从非（人工主动）免疫的哺乳动物（特别是牛）中用已知方法制备初乳，可以实现本发明的目的。结果得到含免疫球蛋白〔Ig〕的产物，其纯度Ig占总蛋白含量的80%以上，且脂肪含量（＜0.4%）和乳糖含量（＜0.1%）均低，迄今为止，它比最有效的人体免疫球蛋白产物“五聚体球蛋白^（R）”（Pentaglolin^（R））有更高的抗体活性。因为抗补体活性极低，所以本发明的产物适用于人口服和用作兽药静脉注射。

本发明最好使用分娩后1至10小时的初乳。如，按常用的乳加工程序将得到的产物提纯和分离之后制成有用的形式，无论是溶液或以干粉在贮存时都是稳定的。

为此，例如，从牛分娩后开始10小时得到的初乳，用蒸馏水按1∶3的比例进行稀释。巴氏消毒之后，从溶液中除去脂肪，接着沉淀并除去（如通过过滤）酪蛋白。用这方法获得的乳清浓缩至所需浓度。无菌过滤，得到产品的稳定的无菌溶液。

用喷雾干燥法也可以得到稳定的产品。结果得到干粉状产品。令人惊奇的是，在喷雾干燥所需温度下（进口温度约145-180℃，隹谖露仍?5-70℃），蛋白质并不发生变性。因而，在上述喷雾干燥条件下，没有形成通常在上述温度下会发生的极度的蛋白质聚集，故未增加蛋白质的抗补体活性。因此，既使应用该稳定方法，所得产品仍具有高的免疫球蛋白（Ig）含量（大于80%）和低的抗补体活性及完全的生物活性。

此外，可在应用上述方法之一的稳定步骤前后，用辛酸沉淀，以进一步提高免疫球蛋白的含量至90%以上，而抗补体活性不受影响。

用其它已知方法，也能从分娩后开始10小时得到的初乳中制备具有高抗体活性的免疫球蛋白的产物。例如可以使用西德专利3，342，718的特定方法。为此，首先使非（人工主动）免疫牛的初乳酸化及粗过滤（除去酪蛋白），随后用氯化钠溶液稀释。用该方法得到的上清液先初步过滤，随后浓缩、中和。为了稳定浓缩的乳清，可以进行无菌过滤或喷雾干燥，如果合适，也可用辛酸沉淀，以提高产品的纯度。

免疫球蛋白（Ig）产品的制备

实例1：