[发明专利]促进变性剂溶液中所含的重组蛋白形成分子内二硫键的方法无效
| 申请号: | 88107077.7 | 申请日: | 1988-10-14 |
| 公开(公告)号: | CN1025350C | 公开(公告)日: | 1994-07-06 |
| 发明(设计)人: | 詹姆斯·E·西利;杨雷德 | 申请(专利权)人: | 皮特曼-穆尔有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/00 | 分类号: | C12N15/00;C12P21/00 |
| 代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 姜建成,曹恒兴 |
| 地址: | 美国印*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 促进 变性 溶液 重组 蛋白 形成 分子 二硫键 方法 | ||
1、一种促进变性剂溶液中所含的还原型重组牛、猪、鸟、羊或人生长激素(rST)形成分子内二硫键的方法,所述变性剂溶液由0.05-5%(重量)SDS溶液或5-9M脲溶液、或4-9M盐酸胍溶液组成,其特征在于,该方法包括:
使rST与胱氨酸在同一变性剂溶液中以每摩尔rST约0.5-10摩尔胱氨酸的浓度反应。
2、权利要求1的方法,其特征在于变性剂溶液为0.1-2%(重量)SDS溶液。
3、权利要求1的方法,其特征在于rST为猪或牛的rST。
4、权利要求1的方法,其特征在于变性剂溶液中rST的浓度为约0.05-10mg/ml。
5、权利要求1的方法,其特征在于变性剂溶液的pH维持在约7-11。
6、权利要求1的方法,其特征在于使胱氨酸与rST反应约6-48小时。
7、权利要求1的方法,其特征在于使胱氨酸与rST反应约12-36小时。
8、一种促进0.05-5%(重量)SDS变性剂溶液中的0.05-10mg/ml还原型重组牛、猪、鸟、羊或人生长激素(rST)在pH7-11下形成分子内二硫键的方法,其特征在于,该方法包括:
使rST与约0.5-10摩尔胱氨酸/摩尔rST反应约6-48小时,以氧化rST的游离巯基而形成分子内二硫键。
9、权利要求8的方法,其特征在于变性剂溶液为0.1-2%(重量)SDS溶液。
10、权利要求9的方法,其特征在于rST为猪或牛的rST。
11、权利要求8的方法,其特征在于变性剂溶液中rST的浓度为约1-3mg/ml。
12、权利要求8的方法,其特征在于使胱氨酸与rST反应约12-36小时。
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