[发明专利]食用菌通氧制种方法

说明书

本发明涉及一种在食用菌制种过程中，给培菌容器内加入氧气的制种方法。

人工栽培食用菌的关键环节是制种，最常见的制种方法是固体培养基制种，培养基多以木屑、豆渣、酒糟、米糠、棉籽壳、甘蔗渣等为原料，这样的制种方法，制种时间约50～70天。日本专利J62069936公开的一种制种栽培方法，在制种过程中采用供氧工艺，所使用的培养基为锯屑、豆渣、稻糠等，制种周期为40～45天。国内山东鲁西南食用菌研究所的栽培技术为液体制种增氧速育，所选用的培养基原料为：木屑、棉籽壳、稻草、麦秸、玉米芯、甘蔗渣、酒糟等其中的任意一种，培养周期为30天左右。另外，还有一种普遍使用的制种方法是采用电动机带动振荡床制种，此种方法的制种时间虽只有10～12天，但是造价较高，而且在制种的全过程中必须保证供电不终断，如若停电40分钟，菌种将会死亡。

本发明的目的在于提供一种快速制备菌种的方法。

本发明综合了上述各技术中的先进部分，选用新的培养基配方，液体制种。其培养基的原料为：葡萄糖、玉米粉、酵母粉、蛋白胨、食盐、VB1、硫酸镁、磷酸二氢钾、豆粉、味精。加水煮沸溶解，pH自然，将培养基分别装入三个瓶中，在接入母种后，直接接入氧气于瓶中，分为三级制种，一级制种完成后，将第一个瓶中的营养液移入第二个瓶中，继续对第二个瓶充氧，二级制种再将营养液移入第三个瓶中，继续对第三个瓶子充氧，三级制种完成。经过此三级制种，仅用周期7～8天，所需制种量也大大减少。

本发明的培养基的基本配方有两种，其一是：

葡萄糖：20克

玉米粉：10克

酵母粉：10克

蛋白胨：10克

食盐：1克

VB1：2克

硫酸镁：0.04克

磷酸二氢钾：0.04克

水：10000ml

PH值：自然

其二是：

葡萄糖：20克

玉米粉：10克

酵母粉：10克

蛋白胨：10克

豆粉：10克

味精：0.1克

食盐：0.3克

VB1：1克

磷酸二氢钾：0.5克

硫酸镁：0.3克

水：10000ml

PH值：自然

以配方一为例，将10000ml水放入锅内烧开，加入玉米粉，均匀搅拌使其不结块，煮沸后放入其它成分，待其全部溶解后，用多层纱布过滤，分装在三个瓶里，其中：70ml营养液装在100ml的瓶中，630ml营养液装于1000ml的瓶中，7300ml的营养液装入10000ml的瓶中。瓶子均使用广口瓶。将玻璃管的下端插入瓶底。上端用胶管套住扎死，瓶口用棉塞塞紧。然后将胶管、过滤器等物连接好，并用塑料袋包扎，连同盛有营养液的瓶子一起放入高压锅中消毒。在1.5公斤/cm压力下灭菌30分钟，或放入常压锅中灭菌2～3小时。消毒完成后，用无菌操作法，将试管中母种切成碎片，接入100ml容量的广口瓶中（也可将子实体组织直接接入）。接种后，在22～25℃下静止培养2天（48小时），在确认营养液未被杂菌污染的情况下通入氧气，其充氧速度为300ml/分钟。直接向营养液内通入氧气的目的在于：一是满足菌丝体（球）发育对氧的需求，二是靠氧气的鼓动，使菌丝体（球）正常生长发育。当100ml容量的瓶中营养液里充满0.5～1cm长的菌丝片段或球时，一级制种完成，所需时间2天。一级制种完成后，利用缸吸法或在无菌的条件下将100ml容量瓶内的菌丝体（球）连同营养液一起转到1000ml容量的瓶中，继续以500ml/分钟的流速向瓶中充氧，连续充氧1.5天（36小时），二级制种完成。以同样的方法将1000ml容量瓶中的菌丝体（球）及营养液转到10000ml容量的广口瓶中，以900ml/分钟的充氧速度继续不间断通氧培养1.5天（36小时），三级制种完成。此时，整个制种周期结束，历时7～8天，即可栽培接种。

本发明的优点是：经过18天左右的栽培养育，便可摘取果实供应市场。从制种到采摘共计25～26天，大大缩短了培养周期生物学效率可达120%。