[其他]人类非小细胞肺癌及其它几种癌症的单克隆抗和抗原

说明书

此项发明涉及一种新的单克隆抗体还涉及对于癌症抗原具专一性的新的单克隆抗体的生产和使用方法。更为特别的是，本项发明的单抗对于与人类非小细胞肺癌（NSCLC）及某些其它癌症包括某些乳腺癌、结肠癌等联合的蛋白质抗原是免疫学特异的和（或）具有免疫学活性的。

此项发明的单抗能与NSCLC细胞及其它癌细胞（包括乳腺癌、结肠癌和小细胞肺癌）的糖蛋白抗原决定簇反应。本发明的单抗具有突出的特性和反应能力，这使该抗体适合于体内、体外临床诊断之目的。此外，此单抗还适用于治疗服用。例如，它可以作为许多试剂的靶向选择载体，而这些试剂具有抗癌效应;这些试剂包括：化疗药物，毒素，免疫反应效应物，以及放射性同位素但并不限于此。而且，生产这种单克隆抗体的杂交瘤可用重组DNA技术进行修饰，以使所产生的抗体能介导依赖于抗体的细胞毒性，或者，可以在补体存在下溶解癌细胞。

2.

2.1人类肺癌

死于癌症的男性大部分是由于肺癌;在死于癌症的女性中肺癌正超过乳腺癌而成为最常见的死因。按组织学类型这种疾病可分为四类;（1）表皮状或鳞装（30%），（2）腺癌（35%），（3）未分化的大细胞（15%），（4）小细胞（20%）。非小细胞肺癌（NSCLC）包括下列细胞类型;表皮样癌细胞，腺癌细胞，大的未分化的癌细胞。

大多数肺癌不能用化疗和放射法治愈。小细胞肺癌在化疗和放疗下可能缩小尺寸，但不能完全治好。最有效的治疗可能只有手术切除瘤子。然而，不幸的是少于30%的肺癌病人的瘤子能在诊断后被完全切除。其中，在完全切除瘤子后，只有少于1/3的病人能存活五年。这种情形就要求有尽可能早期诊断肺癌的方法，确定癌症扩散程度的方法以及更有效的治疗方法。

2.2单克隆抗体

单克隆抗体是均一的抗体分子，它与具有特异性结合或亲合常数的抗原上的单一分子位点（即表面决定簇）相结合，在现有技术中有三种制备它们的方法。

单克隆抗体可以用Kohler和Milstein设计的杂交瘤技术制备（1975，Nature    256;495;1976，Eur.J.Immunol.6;511）。通过将产生抗体细胞（脾淋巴细胞）与骨髓瘤细胞融合，Kohler和Milstein创造了杂交细胞，从这种杂交细胞得到了具有产生抗体的能力和在细胞培养基中永久生长的能力的永久细胞系。杂交瘤分泌一种单一类型的免疫球蛋白，这种免疫球蛋白的抗原特异性取决于淋巴细胞所暴露的抗原。

此外，单克隆抗体可用体外转化哺乳类动物外围血液B淋巴细胞而产生。例如，使用非洲淋巴瘤病毒（EBV）。该病毒使产生抗体的淋巴细胞不死。文献中可以见到这种转化技术（例如，见Steinmetz    et    al.1977，Nature    269;420;Crawford    et    al.，1983，The    Lancet，i：386）。

最后，可以使用结合了EBV-不灭技术和细胞融合或杂交技术生产单克隆抗体。科尔等人描述了将人类浆细胞瘤或淋巴细胞瘤细胞系与EBV转化的给体淋巴细胞相融合的技术，这种给体淋巴细胞已予先建立了细胞（1985年，《单克隆抗体与癌症治疗》，Alan    Liss，Inc.，第77-96页）。在这个体系中，两个亲本细胞系都不死。因此，融合的双方必须有适当的药物标记，以便在培养融合杂交瘤时对亲本细胞进行反选择。所得到的EBV杂交瘤将产生具有所使用的EBV-淋巴细胞系特异性的抗体。

单克隆抗体可通过体外培养特定杂交瘤或转化的细胞系的方法大量生产。此外，将一杂交瘤细胞系植入适合的哺乳动物和小鼠的腹腔，便会产生肿瘤，该肿瘤将高浓度（1～20mg/ml）单克隆抗体分泌到肿瘤腹水液中，移出腹水，纯化单克隆抗体，一只小鼠就可以提供足够上千次诊断检定所需要的抗体。

2.3与肺癌有关的单克隆抗体与抗原