[其他]被取代的胍基苯甲酸苯酯生产方法和其作为药剂的应用

说明书

本发明是关于新的被取代的胍基苯甲酸苯酯，它的应用以及它的制备方法，和按照权利要求含有这种化合物的药物制剂。

4-胍基苯甲酸的芳基酯适宜于阴道避孕（美国专利说明书4423，069）。它作为受孕的主要酶，精虫头粒旦白的一种抑制剂而起作用，这种酶是一种处于精虫头粒内部的丝氨酸-朊酶。精虫头粒旦白对受孕部分至关重要，在此部分精子透过明带（卵膜），包围卵细胞的三层的最内层。

现已找到，存在通式为Ⅰ

的新的胍基苯甲酸脂，其中X为-氢原子，-氰基或-带1-4个炭原子的烷氧基，例如甲氧基-，乙氧基-或丙氧基团，而y为-氢原子，-具有1-4个炭原子的烷氧基或烷氧羰基，例如：甲氧基-，乙氧基-，丙氧基-或甲氧羰基-，乙氧羰基-，丙氧羰基团，或一个NRR′-基团，R和R′为氢原子或带1-4个炭原子的低饱和烷基，例如甲基-，乙基-，丙基-或异丙基团，在这当中，x和y不应同时为氢，以及其生理上无副作用的有机或无机酸的盐类，例如盐酸，柠檬酸或对-甲苯磺酸，与已知的芳基-胍基苯甲酸盐相比不仅作为（人的）-精虫头粒蛋白抑制剂，而且也作为在动物实验中的避孕药，具有一种出乎预料的、明显的、较强的作用。

药理学的观察：

1），精虫头粒蛋白的（人类的）-检定

这种试验体现了真正的第一次筛选，它指出了一种论据，对有关酶（人类的精虫头粒蛋白）本身的一种化合物的抑制作用，但还没能陈述出所试验化合物的生物效应（也就是说，在正常的精子中精虫头粒蛋白的抑制以及避孕的效应）。

由人的精子通过酸性抽提获得的酶，精虫头粒蛋白，用有药效的抑制剂的不同浓度进行培育，并确定了这种浓度，该浓度导致精虫头粒蛋白的活性有50%的抑制。丝氨酸-朊酶精虫头粒蛋白以生理的方式主要分裂成精氨酸组和赖氨酸组，因此对于用来确定精虫头粒蛋白活性的在活体外的试验，使用了苯甲酰-精氨酸-乙基脂作为基质。

测得的数据（表1）不仅证明了本发明的化合物（号2至6）对酶，精虫头粒蛋白有抑制作用，它也证明了其效果大于已知的被视为铅-化合物的Ⅰ号物质。

2），凝胶分解

这种试验同样可视为第一次筛选的组成部分。对于所希望的精虫头粒蛋白所抑制的避孕作用，（除了在分离出的酶的原有的精虫头粒蛋白抑制之外），是有重要意义的，这样一种抑制剂能够通过原生质膜和一个正常精子外边的精虫头粒膜，因为精虫头粒蛋白是在内部的精虫头粒膜上。

按照皮、加杜姆和尔、蔡，波兰岛（科学170：745-751）的凝胶分解模型，根据威、比、希勒修改的（国际月刊，男性生殖器病学4：25-38）并且按照自己的制作，证明特别适于这种特殊课题的试验。在这种方法中，用于自射线照相，用末爆光定影的和用亚甲蓝着色的胶片进行工作，通过精虫头粒蛋白溶解的活动，使其凝胶层溶解。其后果是在精子的头部周围生成了明显可见的广阔晕圈（所谓的晕圈-形成，细胞溶解晕）。在抑制精虫头粒蛋白时，不形成这种晕圈。

为了试验证实的精虫头粒蛋白抑制剂的渗透性和由此在正常精子出现抑制精虫头粒蛋白，用多种抑制剂浓度预先培育了人的精液。接着，在相应的预先准备好的条件下（见上），在显微镜的载物玻片的凝胶小片上，涂上部分精液，并在血库潮湿的空气中培育，接着在反差显微镜下半微量地测定晕圈构成的强度。

在表2中这种试验陈述了药理学结果，代表申请要求保护的化合物，与已知的铅-化合物（1号）相比证明了所述物质的作用和优越性。

3），在活体外受精（老鼠）

这个试验可以首先核实避孕效果，以及核实其作用原理。

按照波伦斯特，威查和威廷海姆在一介质滴中，它含有抑制剂，首先转化成由排卵过速取得的卵母细胞，接着以吸移液管添加一未经处理的老鼠精液的一部分。这样选择抑制剂，使不产生抑制有机体的能动性。24小时以后测定分裂的和没有分裂的卵母细胞，并由此定出受孕率。

因此要审查，是否要试验的精虫头粒蛋白抑制剂，以一种方式给药，这种给药方式使卵母细胞和精子直接接触，能够阻止受孕而没有阻碍精子的能动性。

在表3中，举出了基于这类试验测定了本发明物质的阻碍受孕的作用，用2-氰基-或3-甲氧基羰基-化合物（号码2或3）的例子与以前已知的铅-物质（号码1）相比;这些数值显示出新物质有明显的优越性。

4），预先培育的精子按照人工授精在活体内受精（家兔）

这个试验在活体内条件的情况下，能够说明避孕作用：