[发明专利]糖类的分析法及其装置

说明书

本发明是关于糖类的分析法及其装置。

本发明的发明人已经在特开昭58-216953号公报上公开发表过糖类的分析法及其装置。即：将含有糖类的试样装入液体色谱仪中，对所得到的洗提液，添加由含碱性氨基酸的硼酸水溶液组成的反应试剂，进行加热反应后冷却，通过照射激发光测定荧光光度和（或）照射紫外线测定吸光光度分析糖类的方法，以及对液体色谱仪装置本体，从其柱洗提液流路开始安装反应液流路，并将添加碱性氨基酸的硼酸水溶液的供给流路与此流路连结，接着按顺序附设加热部与冷却部以及荧光光度测定部和（或）紫外线吸光光度测定部，

在上述的分析技术中，是由含有碱性氨基酸的硼酸水溶液组成的反应试剂加入洗提液进行反应，而洗提液是把含有糖类的试样装在液体色谱装置中洗提得到的，因此必须安装一条供给流路，以便将上述反应试剂添加到洗提液中，而且反应试剂与洗提液的混合不充分，于是所得到的色谱图有时会产生杂音或漂移。

本发明的目的，就是为了改良原来的分析法及其装置，并简化原来的分析法及其装置，提供能进行精度高、再现性好的糖类的分析法及其装置。

本发明是将含有糖类的试样，装在使用含反应试剂氨基酸与硼酸的流动相的液体色谱仪装置中进行洗提，加热所得到的洗提液，使反应试剂与糖类进行反应后冷却，通过对生成的反应液照射激发光测定荧光光度和（或）照射紫外线测定吸光光度，分析糖类的糖类分析法，以及实施这种分析法直接使用的分析装置即按顺序连结装有反应试剂氨基酸与硼酸的流动相容器、流动相输液泵、由试样注入部与分离柱组成的液体色谱仪装置、装有加热槽的反应部、冷却部与荧光光度测定部以及（或）紫外线吸收光谱测定部的糖类分析装置。

本发明的发明人，发现即使在流动相中混合反应试剂，对分离柱中糖类的分离也没有什么坏影响，从而完成了本发明的分析法。其优点是：由于反应试剂混合到流动相中，因此不会象先有技术那样，因洗提液与反应试剂混合而引起色谱仪的杂音与漂移，而且还可不安装供给反应试剂的流路。

本发明所用的氨基酸有：精氨酸、赖氨酸、组氨酸等。流动相是含0.01～5%浓度的氨基酸与0.05～0.5M硼酸的水溶液，用氢氧化钾把pH调整到约7～10。

含有糖类的试料使用上述流动相，利用通常使用的Shim-pack    ISA-07/s2504（岛津制作所制）的分离柱进行洗提。洗提是在室温～70℃下进行的。接着，将所得的洗提液加热，让糖类与上述的反应试剂进行反应。这一反应最好在140～180℃温度下在3～5分钟内进行，生成的反应液冷却至室温并把它导入荧光光度计和（或）紫外线吸光光度计，通过测定荧光光度与（或）吸光光度，定性和（或）定量地分析糖类。

另一方面，本发明的分析装置主要构成的特点是：因如前所述反应试剂含在流动相中，若与先有技术的装置相比，特别简化的是不必装设反应试剂的供给流路。而且本发明是连续式和单程式的，能够进行快速分析，并可完全自动化。

利用本发明的分析法及其装置分析的糖类有：葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖、鼠李糖等单糖;麦芽糖、乳精、麦芽三糖等低聚多糖;葡糖胺、半乳糖胺等氨基糖;葡糖醛酸、半乳糖醛酸等糖醛酸。这些糖类都能使用。特别象生物试样，利用这些糖类，最适于分析含微量或多成分的试样。

实施例

根据下图所示的实施例来说明本发明，但并不限制本发明。

第1图所示系本发明的分析装置实施例之一的构成说明图。这种分析装置，按顺序通过流路连结液体色谱仪（1）、反应部（2）、装有冷却管（2c）的冷却部（3）以及荧光光度测定部和（或）紫外线吸光光度测定部（4）。

液体色谱仪（1）由以下几种部件构成：含反应试剂氨基酸与硼酸的流动相（5）进入的流动相容器（6）、流动相输液泵（7）、试样注入部（8）与装有恒温槽的分离柱（9）。

反应部（2）的构成是：将反应管（10）、热源电加热器（11）与温度控制用感热体（12）以及热介质（13）一起装在里面的内槽（14），以及通过绝热材料（15）封装内槽的外槽（16）。

测定部（4）的构成是：荧光光度计与（或）紫外线吸光光度计（17）以及装在其中的记录计（18）与反应液排出管路（19）。

其次，说明使用上述装置的糖类分析法。