[发明专利]一种棉花逆境诱导型启动子pGhERF107及其制备方法和应用

说明书

本申请公开了一种棉花逆境诱导型启动子pGhERF107及其制备方法和应用，涉及棉花基因工程技术领域。其中，所述启动子pGhERF107具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。本申请构建的pGhERF107::GUS启动子pGhERF107::DR26载体并转化棉花，对转基因棉花进行非生物逆境处理观察GUS表达活性分析，发现pGhERF107::GUS多个转基因株系在逆境处理下能增强GUS和DR26的表达，可以应用到棉花抗逆的遗传育种实践当中，提高棉花的耐受性和抗性，具有重要意义。

技术领域

本申请涉及棉花基因工程技术领域，具体涉及一种棉花逆境诱导型启动子pGhERF107及其制备方法和应用。

背景技术

棉花是中国重要的经济作物和油料作物，也是天然纤维的主要来源，在我国的国民经济和国家安全中占有重要地位。在农业生产中，环境因素对农作物产量、质量的影响不可忽视。抗逆性较好的作物可以在多变的环境中稳定生长，保持较高水平的产量和质量。随着经济和社会的发展，我国棉花的种植区域开始向干旱区、盐碱地转移。另外，土地盐碱化、水资源短缺、全球气候变暖等因素是棉花生产过程中不可避免的问题，所以经济的发展对于棉花抗逆性的要求进一步提高。

从基因层面研究作物的抗逆性，可以时研究更好地指导育种工作的高效进行。在转基因作物的研究中，启动子是影响转入基因表达效率的一个重要因素，成功地应用转基因植物高产量、高质量地表达外源基因，需要有高效率的启动子。现有报道中棉花中多用CaMV35S启动子进行基因超表达研究，在棉花的生长发育过程中，不论外界是否有逆境出现，含CaMV35S启动子的转基因抗逆作物会持续表达相关抗逆蛋白，然而在无干旱等逆境的外界环境下，抗逆基因的表达会消耗有限的能量，从而不利于作物的正常生长发育。

发明内容

本申请发明人创造性地公开了一种棉花逆境诱导型启动子pGhERF107及其制备方法和应用，通过将该启动子加入到棉花中，使得转基因作物在非逆境条件下可以降低或者不表达外源基因，以节约植物能量且避免外源基因对植物的不良效应(如转基因植株的生长延迟和畸形发育)，在逆境条件下能够显著提高作物外源基因的表达能力。

为此，本申请实施例至少公共了以下技术方案：

第一方面，本申请实施例公开了一种棉花逆境诱导型启动子pGhERF107，其中，所述启动子pGhERF107具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

第二方面，本申请实施例公开了一种包含如第一方面所述的启动子pGhERF107的核苷酸序列的表达盒。

第三方面，本申请实施例公开了一种包含如第一方面所述的启动子pGhERF107的核苷酸序列的重组载体。

第四方面，本申请实施例公开了一种包含如第一方面所述的重组载体的转基因细胞系。

第五方面，本申请实施例公开了一种包含如第一方面所述的重组载体的重组微生物。

第六方面，本申请实施例公开了一种用于扩增如第一方面所述的诱导型启动子pGhERF107的引物对，所述引物对包括：如SEQ ID NO.2所述的正向引物和如SEQ ID NO.3所述的反向引物；或者

如SEQ ID NO.12所述的正向引物和如SEQ ID NO.13所述的反向引物。

第七方面，本申请实施例公开了一种如第一方面所述的诱导型启动子pGhERF107的制备方法，包括如下步骤：以棉花全基因组DNA为模板，利用引物对进行PCR扩增，所述引物对包括：如SEQ ID NO.2所述的正向引物和如SEQ ID NO.3所述的反向引物；或者

如SEQ ID NO.12所述的正向引物和如SEQ ID NO.13所述的反向引物。

第八方面，本申请实施例公开了一种如第一方面所述的诱导型启动子pGhERF107诱导启动目的基因在培育抗逆棉花中的应用。