[发明专利]一种坤泰胶囊中阿胶及其异源性成分的检测方法

权利要求书

1.一种坤泰胶囊中阿胶及其异源性成分的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：

(1)将坤泰胶囊内容物制备成供试品溶液；

(2)将所述供试品溶液进行超高效液相色谱-质谱检测，得到特征谱图，根据所述特征谱图测定阿胶特征多肽的含量，并判断异源性成分；

所述阿胶特征多肽包括驴源多肽A1、驴源多肽A2；

所述异源性成分包括龟甲胶、鹿角胶、黄明胶、新阿胶、牛皮特征肽A、马源寡肽A。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液采用如下方法进行制备，所述方法包括：将所述坤泰胶囊内容物采用碳酸氢铵溶液溶解后，离心，取上清液，将所述上清液进行酶解，得到所述供试品溶液。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述碳酸氢铵溶液中碳酸氢铵的质量百分含量为0.8-1.2％；

优选地，所述溶解时的料液比为1:(80-120)。

4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述酶解采用的酶制剂为胰蛋白酶溶液；

优选地，所述胰蛋白酶溶液中胰蛋白酶的浓度为0.8-1.2μg/μL。

5.根据权利要求1-4任一项所述的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱-质谱检测的检测条件如下：柱温为35-45℃，流动相A为甲酸水溶液，流动相B为甲酸乙腈溶液，进行梯度洗脱，流速为0.2-0.4mL/min，进样体积为0.8-1.2μL；

优选地，所述甲酸水溶液中甲酸的质量百分含量为0.1-0.3％；

优选地，所述甲酸乙腈溶液中甲酸的质量百分含量为0.1-0.3％。

6.根据权利要求1-5任一项所述的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱-质谱检测的检测条件还包括：采用电喷雾离子化正离子模式下多反应监测，毛细管电压2.7-2.9kV，离子源温度145-155℃，喷雾气与反吹气为N₂，去溶剂气流速800-1200L/h，去溶剂气温度450-550℃。

7.根据权利要求1-6任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括制备对照品溶液的步骤，以及采用和供试品溶液相同的检测方法，检测对照品溶液得到特征谱图的步骤。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述对照品溶液中的对照品为马源寡肽A、牛皮特征肽A、驴源多肽A1和驴源多肽A2；

优选地，所述对照品溶液采用如下方法进行制备，所述方法包括：分别称取马源寡肽A、牛皮特征肽A溶于碳酸氢铵溶液中，再采用基质溶液稀释，分别得到马源寡肽A、牛皮特征肽A对照品溶液；分别称取驴源多肽A1、驴源多肽A2溶于碳酸氢铵溶液中，分别得到驴源多肽A1、驴源多肽A2对照品溶液。

9.根据权利要求1-8任一项所述的检测方法，其特征在于，所述基质溶液采用如下方法进行制备，所述方法包括：称取阿胶对照药材溶于碳酸氢铵溶液中，得到所述基质溶液。

10.根据权利要求1-9任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：

(1)将所述坤泰胶囊内容物采用碳酸氢铵溶液溶解后，离心，取上清液，将所述上清液采用胰蛋白酶溶液进行酶解，得到所述供试品溶液；

所述碳酸氢铵溶液中碳酸氢铵的质量百分含量为0.8-1.2％；所述溶解时的料液比为1:(80-120)；所述胰蛋白酶溶液中胰蛋白酶的浓度为0.8-1.2μg/μL；

(2)将所述供试品溶液进行超高效液相色谱-质谱检测，得到特征谱图，根据所述特征谱图测定阿胶特征多肽的含量，并判断异源性成分；

所述阿胶特征多肽包括驴源多肽A1、驴源多肽A2；

所述异源性成分包括龟甲胶、鹿角胶、黄明胶、新阿胶、牛皮特征肽A、马源寡肽A；

所述超高效液相色谱-质谱检测的检测条件如下：柱温为35-45℃，流动相A为甲酸水溶液，流动相B为甲酸乙腈溶液，进行梯度洗脱，流速为0.2-0.4mL/min，进样体积为0.8-1.2μL；采用电喷雾离子化正离子模式下多反应监测，毛细管电压2.7-2.9kV，离子源温度145-155℃，喷雾气与反吹气为N₂，去溶剂气流速800-1200L/h，去溶剂气温度450-550℃；

所述甲酸水溶液中甲酸的质量百分含量为0.1-0.3％；

所述甲酸乙腈溶液中甲酸的质量百分含量为0.1-0.3％。