[发明专利]一种用于高光谱快速检测的微生物样本的制备方法

说明书

本申请涉及微生物检测的技术领域，具体公开了一种用于高光谱快速检测的微生物样本的制备方法。该方法包括以下步骤：S1、准备待检测样本并接种至固体培养基内，并在28‑37℃、无菌环境中培养至一区、二区长出菌落；S2、挑取二区的菌落至载玻片上制片，将制备好的玻片用于高光谱检测；所述固体培养基的组分包括：血平板培养基、0.04‑0.12mg/L溶血素O和0.01‑0.06mg/L白细胞介素。本申请的方法具有制备周期短、检测结果准确的优点。

技术领域

本申请涉及微生物检测的技术领域，更具体地说，它涉及一种用于高光谱快速检测的微生物样本的制备方法。

背景技术

在对待检测物含有的微生物检测鉴定时，一般的方法步骤是：采集目标物样本，对目标物样本进行预处理，根据涂片染色的结果，选择合适的培养基进行分离培养；根据菌落特点，选择适当的生化反应或者自动化仪器进行鉴定。一般可用于微生物检测鉴定的设备有荧光定量PCR仪、全自动核酸扩增仪、生物质谱仪、高通量基因测序仪以及高光谱分析仪等。

其中，高光谱分析仪因其具有检测高效、准确、无损等优势，作为一种新的微生物检测鉴定设备。同样的，在进行检测前，需要制备检测样本。制备检测样本时涉及到微生物培养的步骤，包括对待检测样本的分析，以选取合适的方法进行样本培养。一般来讲，常规微生物培养需要8-12小时：例如：肠杆菌一般培养10-12h可进行后续操作，而肠球菌一般需要12-18h，另外，有些特殊微生物则需要培养更长时间后再进行后续操作。

显然，上述方法中微生物培养的时间是比较长的，这将直接影响以高光谱分析仪检测鉴定微生物时的效率，因此这也成为高光谱分析仪用于微生物检测鉴定的限制之一。

因此，提供一种基于高光谱分析仪的样本预处理方法是比较重要的。

发明内容

为了缩短微生物鉴定时间、保证检测鉴定结果的准确性，本申请提供一种用于高光谱快速检测的微生物样本的制备方法。

本申请提供的一种用于高光谱快速检测的微生物样本的制备方法，采用如下的技术方案：

一种用于高光谱快速检测的微生物样本的制备方法，包括以下步骤：

S1、准备待检测样本，接种至固体培养基内，并在28-37℃、无菌环境中培养至一区、二区长出菌落；

S2、挑取二区的所述菌落用于制片，随后进行高光谱检测；

所述固体培养基的组分包括：血平板培养基、0.04-0.12mg/L溶血素O和0.01-0.06mg/L白细胞介素。

由于待检测样本的来源不同，因此待检测样本中含有的微生物种类不同；若是待检测样本中含有多种微生物，对该类待检测样本进行微生物检测时一般需要在微生物纯培养的基础上进行，以保证检测结果的准确性。被检测鉴定的微生物中，一般杆菌需要培养至少10-12h，而球菌至少需要12-18h，其他微生物(例如真菌)均需要18-24h左右培养获得才可进行后续操作。若初次培养出2种或2种以上菌种时，还需进行分离纯化培养。此外，由于杆菌和球菌、真菌的生长速度差别较大，一般情况下都是在划线接种后培养至四区长出菌落后，以四区的单菌落进行后续的分析鉴定。进行这样的操作，一方面，充足的培养时间能够确保待检测样本中原本存在的不同种类的微生物均能长出菌落；另一方面，确保不同种类的微生物能够通过多次划线后被充分分离纯化，以便在四区得到纯化的、单一菌落。因此，将该纯化的微生物经制备用于检测时，能够得到准确的检测鉴定结果。