[发明专利]一种梨bZIP类转录因子PubZIP914及其应用

说明书

本发明公开了一种梨bZIP类转录因子PubZIP914及其应用，属于植物分子基因工程技术领域，本发明从梨中分离得到编码PubZIP914转录因子的完整cDNA，连接到植物过表达载体上，利用农杆菌介导转化植物，通过烟草瞬时表达证明PubZIP914定位于植物细胞核内；利用农杆菌注射获得瞬时转化梨果实，分别利用叶盘转化法和组织侵染法获得转基因番茄和转基因梨愈伤，结果表明过表达PubZIP914能够提高植物中挥发性脂肪酸衍生物的合成。本发明为bZIP转录因子促进植物挥发性脂肪酸衍生物合成的研究提供了研究基础和基因资源。

技术领域

本发明属于植物分子基因工程技术领域，具体涉及一种梨bZIP类转录因子PubZIP914及其应用。

背景技术

梨(蔷薇科梨属)是温带地区最重要的水果作物之一，具有很高的经济价值，目前在50多个国家均有种植。国内种植较为广泛的亚洲梨品种可分为四种：白梨(P.bretschneideri Rehd.)、秋子梨(P.ussuriensis Max.)、砂梨(P.pyrifolia Nakai.)和新疆梨(P.sinkiangensis Yu.)。大多数亚洲梨果实的果肉偏脆，汁水清甜，香气偏淡。然而秋子梨中的‘南果’梨，果实经后熟会释放出非常浓郁的果香和酒香，因其香味宜人，口感特别而受到广泛关注，是我国主要栽培的秋子梨品种之一。‘南果’梨成熟果实中的主要香气成分是己酸乙酯，乙酸乙酯和乙酸己酯。然而市场上最为流行的梨品种主要是白梨、砂梨和新疆梨，挥发性化合物种类较少且浓度较低。

香气浓郁的梨果实更容易吸引消费者前来购买，南果梨是香气机理研究的良好材料。因此，利用基因工程技术针对挥发性化合物的关键调控因子进行遗传改良，对于改善淡香梨品种的香气含量具有重要意义。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于一种梨bZIP类转录因子PubZIP914及其应用。

本发明解决其技术问题采用的技术方案是：

第一方面，本发明保护一种梨bZIP类转录因子PubZIP914，其选自如下a)、b)或c)：

a)其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

b)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个核苷酸；

c)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。

第二方面，本发明保护前文所述的转录因子PubZIP914基因编码的蛋白。

在具体的实施方案中，所述蛋白选自如下A)或B)：

A)如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列；

B)SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个氨基酸且具有相同活性的由1)衍生的蛋白。

第三方面，本发明保护扩增前文所述的转录因子PubZIP914基因全长或任一片段的引物对。

在具体的实施方案中，所述引物对包括引物对A和/或引物对B，其中引物对A如SEQID No.3～4所示；引物对B如SEQ ID No.5～6所示。

第四方面，本发明还保护含有前文所述的转录因子PubZIP914基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系、或基因工程菌。

在具体的实施方案中，本发明提供两种重组表达载体的构建方法：

方法一：将前文所述的基因PubZIP914插入到pCAMBIA1301的XbaI和BamHI位点之间得到重组表达载体35S-PubZIP914-GFP。

方法二：将前文所述的基因PubZIP914插入到PSAK277的HindⅢ和XbaⅠ位点之间得到重组表达载体PSAK277-PubZIP914。