[发明专利]林蛙特异性序列、引物及利用其鉴定林蛙或林蛙油的方法在审
| 申请号： | 202310474484.2 | 申请日： | 2023-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN116497131A | 公开（公告）日： | 2023-07-28 |
| 发明（设计）人： | 彭英华;郭佳;陈泽;庞鑫;孙泽鹏 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院特产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 邓宇 |
| 地址： | 130112 吉林省长*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 特异性 序列 引物 利用 鉴定 林蛙油 方法 | ||
1.一种林蛙特异性序列COI，其特征在于，所述林蛙特异性序列COI的核苷酸序列如SEQID NO.1所示。
2.权利要求1所述林蛙特异性序列COI在鉴定林蛙中的应用。
3.权利要求1所述林蛙特异性序列COI在鉴定林蛙油中的应用。
4.一种用于扩增权利要求1所述林蛙特异性序列COI中部分片段的引物对，其特征在于，所述引物对的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，下游引物核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示。
5.权利要求4所述引物对在鉴定林蛙中的应用。
6.权利要求4所述引物对在鉴定林蛙油中的应用。
7.一种利用PCR鉴定林蛙的方法，其特征在于，所述方法为提取蛙油DNA，以蛙油DNA为模板，进行PCR扩增，若PCR结果显示240bp处具有明亮的单一条带，则判断样本为林蛙；所述PCR扩增所用引物对的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
8.一种利用PCR鉴定林蛙油的方法，其特征在于，所述方法为提取蛙油DNA，以蛙油DNA为模板，进行PCR扩增，若PCR结果显示240bp处具有明亮的单一条带，则判断样本为林蛙油；所述PCR扩增所用引物对的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
9.根据权利要求7或8任意一项所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系为2×EsTaqMasterMix10.0μL，上下游引物各1μL，DNA模板4μL，ddH2O4μL。
10.根据权利要求7或8任意一项所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的程序为94℃预变性2min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃2min。
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