[发明专利]一种代谢工程改造热带假丝酵母生产鼠尾草酸的方法在审
| 申请号： | 202310442613.X | 申请日： | 2023-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN116478845A | 公开（公告）日： | 2023-07-25 |
| 发明（设计）人： | 陈献忠;曹钰;杨海泉;霍达 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N9/02;C12N9/10;C12N15/53;C12N15/54;C12P7/42;C12R1/74 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇钰莹 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 代谢 工程 改造 热带 酵母 生产 草酸 方法 | ||
1.一种重组热带假丝酵母，其特征在于，在热带假丝酵母基因组上整合表达SEQ IDNO.1所示的铁锈醇合酶CYP76AH24、SEQ ID NO.3所示的细胞色素还原酶ATR1和SEQ IDNO.5所示的鼠尾草酸合酶CYP76AK6，并下调表达SEQ ID NO.7所示的角鲨烯合酶ERG9。
2.如权利要求1所述的重组热带假丝酵母，其特征在于，所述整合表达的位点为木糖还原酶位点；所述铁锈醇合酶CYP76AH24和细胞色素还原酶ATR1之间以SEQ ID NO.9所示氨基酸序列连接。
3.如权利要求2所述的重组热带假丝酵母，其特征在于，在宿主细胞的DPP3位点整合表达双拷贝的细胞色素还原酶ATR1基因。
4.如权利要求3所述的重组热带假丝酵母，其特征在于，编码所述铁锈醇合酶CYP76AH24的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；编码所述细胞色素还原酶ATR1的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；编码所述鼠尾草酸合酶CYP76AK6的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；编码所述角鲨烯合酶ERG9的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
5.如权利要求4所述的重组热带假丝酵母，其特征在于，所述重组热带假丝酵母的宿主细胞为热带假丝酵母1C2P-PM04。
6.一种制备鼠尾草酸的方法，其特征在于，将权利要求1～5任一所述重组热带假丝酵母在培养基中于29.5～30.5℃发酵。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述发酵的转速为199～201r/min。
8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述培养基包含酵母粉10g/L，蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，至少发酵96h。
10.权利要求1～5任一所述重组热带假丝酵母或权利要求6～9任一所述的方法在制备鼠尾草酸或含鼠尾草酸的产品中的应用。
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