[发明专利]一种枯草芽孢杆菌TN、活菌制剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种枯草芽孢杆菌TN，其特征在于：于2023年3月8日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，菌株保藏号为GDMCC No:63246，保藏地址为广东省广州市先烈中路100号。

2.一种枯草芽孢杆菌活菌制剂，其特征在于：包括如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌TN及其生理代谢产物和营养液。

3.根据权利要求2所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂，其特征在于：

所述生理代谢产物包括纳豆多糖和纳豆蛋白酶。

4.一种枯草芽孢杆菌活菌制剂的制备方法，其特征在于：用于制备如权利要求2-3任一项所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂，主要包括以下步骤：

将枯草芽孢杆菌TN放入LB液体培养基中，37℃摇床培养24h，得枯草芽孢杆菌菌液；

将所述菌液与营养液混合，37℃培养箱中培养20h，过滤后即得枯草芽孢杆菌活菌制剂。

5.如权利要求4所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂的制备方法，其特征在于：

所述营养液的制备包括以下步骤：

将黄豆清洗后充分浸泡，并加入大豆蛋白胨和琼脂溶解；

溶解完成后，蒸或煮1h后，冷却，即得营养液。

6.如权利要求4所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂的制备方法，其特征在于：

所述枯草芽孢杆菌TN的制备包括以下步骤：

将水稻秸秆进行预处理，得消毒后的水稻秸秆；

将消毒后的水稻秸秆研磨制成样品悬液，涂布于LB固体培养基上进行培养，生成菌落；

通过平板划线法对新长出的菌落进行分离纯化；

将纯化后的菌株保存于保存液中储存，得到枯草芽孢杆菌TN。

7.如权利要求6所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂的制备方法，其特征在于：

所述将水稻秸秆进行预处理包括：

将水稻秸秆用灭过菌的剪刀剪成3～5cm的小段，用2％的次氯酸钠浸泡2min，再用70％酒精浸泡2min后，用无菌水清洗若干次。

8.如权利要求6所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂的制备方法，其特征在于：

所述将水稻秸秆研磨制成样品悬液，包括：

将消毒后的水稻秸秆的两端各剪去1cm，加入无菌水和石英砂，用研磨棒充分研磨，并按10倍梯度稀释，分别得到浓度为10^－4、10^－5和10^－6的样品悬浮液。

9.如权利要求6所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂的制备方法，其特征在于：

所述保存液包括以下组分：20％的甘油。

10.一种枯草芽孢杆菌活菌制剂的应用，其特征在于：如权利要求2-3任一项所述的枯草芽孢杆菌活菌制剂在治疗烧伤创面的应用。