[发明专利]一种检测人类SLCO1B1基因多态性的引物探针组、试剂盒及检测方法和应用

说明书

本申请公开了一种检测人类SLCO1B1基因多态性的引物探针组、试剂盒及检测方法和应用，所述一种检测人类SLCO1B1基因多态性的引物探针组包括用于检测人类SLCO1B1基因388位点多态性的引物探针组A、用于检测人类SLCO1B1基因521位点多态性的引物探针组B以及用于检测人类Actin基因的内标Actin引物探针组C；同时，本申请提供一种检测人类SLCO1B1基因多态性的检测试剂盒，所述检测试剂盒包括检测人类SLCO1B1基因多态性的引物探针组。本申请优点是，本申请试剂盒能够实现对人类SLCO1B1基因多态性的快速检测，且操作简单，灵敏准确。

技术领域

本申请属于一种生物医学领域临床检测技术中的核酸检测技术领域，具体是涉及到一种检测人类SLCO1B1基因多态性的引物探针组、试剂盒及检测方法和应用

背景技术

辛伐他汀(Simvastatin)是一种口服降血脂药物，可用于治疗高脂血症、冠心病等患者。辛伐他汀可降低正常的和升高的低密度脂蛋白胆固醇水平，还可降低极低密度脂蛋白和甘油三酯，并升高高密度脂蛋白胆固醇。辛伐他汀除了预防心血管疾病，还能够改善肝微血管功能障碍，延缓纤维化现状，预防低血容量性休克后的肝损伤等。

目前认为辛伐他汀是改善肝功能最有效的他汀类药物。辛伐他汀相关的肌肉不良反应包括肌病、横纹肌溶解等。导致这些不良反应的原因中，SLCO1B1基因多态性是导致辛伐他汀肌肉不良反应个体化差异的主要原因之一。与野生型个体相比，携带SLCO1B1功能异常基因的个体的肝细胞药物摄取受损，导致药物血浆暴露显著增加，可能增加肌病的发生风险。因此对SLCO1B1基因多态性的研究显得尤为重要。

目前对于SLCO1B1基因已有的检测方法，在推广上或多或少都存在如试剂检测成本高，操作复杂，易产生污染，产生一定的假阴性和假阳性等缺陷。其中直接测序法，虽然是SNP位点分析的金标准，但该检测方法受到测序仪器的限制，测序仪器昂贵，推广困难。另外直接测序对模板量要求高，通常需要通过PCR扩增富集目的片段后，进行测序，操作复杂，周期长，且为开管操作，容易造成污染。

基因芯片杂交法，操作步骤烦琐，易出错，实验耗时4个小时以上并且PCR结束后需开管操作，易造成污染的问题。此外，该检测方法用肉眼来对结果进行判读，导致准确性会受到影响，导致检测结果中出现假阳性、假阴性的判读结果。

PCR探针分型法虽然具有操作简单，分型准确，全程闭管操作，检测周期短等特点，是目前比较主流的SNP分型方法。但是目前市面上已有通过CFDA认证的成型检测试剂盒，其产品扩增曲线很容易产生翘尾现象，导致假阳性的产生。

PCR-RFLP法将PCR与限制性酶切相结合的传统方法，由于酶切操作繁琐及污染风险已经很少在临床使用。

因此，急需一种操作简便、灵敏准确、成本低且能实现快速检测人类SLCO1B1基因多态性的检测方法。

发明内容

为了解决上述至少一种技术问题，本申请提供一种检测人类SLCO1B1基因多态性的引物探针组、试剂盒及检测方法和应用。

第一方面，本申请提供一种检测人类SLCO1B1基因多态性的引物探针组，包括用于检测人类SLCO1B1基因388位点多态性的引物探针组A、用于检测人类SLCO1B1基因521位点多态性的引物探针组B以及内标Actin基因的引物探针组C；

其中，所述用于检测人类SLCO1B1基因388位点多态性的引物探针组A包括：

上游引物SLCO1B1-388-F：其基因序列如SEQ ID No.1所示；

下游引物SLCO1B1-388-R：其基因序列如SEQ ID No.2所示；

荧光探针SLCO1B1-388-P：其基因序列如SEQ ID No.3所示；

所述用于检测人类SLCO1B1基因521位点多态性的引物探针组B包括：