[发明专利]一种合成2,5-呋喃二甲醇或糠醇的方法在审
申请号: | 202310369943.0 | 申请日: | 2023-04-10 |
公开(公告)号: | CN116622789A | 公开(公告)日: | 2023-08-22 |
发明(设计)人: | 李宁;吴倩;宗敏华 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | C12P17/04 | 分类号: | C12P17/04;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/53;C12R1/19 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 宫爱鹏 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 合成 呋喃 甲醇 方法 | ||
1.一种合成2,5-呋喃二甲醇或糠醇的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将醇脱氢酶YjgB基因与葡萄糖脱氢酶GDH Q252L基因共同连接到载体pETDuet-1中,导入Escherichia coli BL21(DE3)中构建共表达体系,得到共表达重组菌E.coli-YjgB-GDH;
(2)将上述重组菌加入含有呋喃醛、辅底物、碳酸钙的磷酸盐缓冲液中,反应后得到2,5-呋喃二甲醇或糠醇;所述呋喃醛为5-羟甲基糠醛或糠醛。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述醇脱氢酶YjgB基因来源于Escherichia coli BL21(DE3);所述葡萄糖脱氢酶GDH基因来源于Bacillus megateriumIWG3,且是Q252L突变体。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述醇脱氢酶YjgB基因的核苷酸序列为SEQ ID.1;所述葡萄糖脱氢酶GDH Q252L基因的核苷酸序列为SEQ ID.2。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述5-羟甲基糠醛浓度为0.02~1.0M;糠醛的浓度为0.02~0.5M。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述呋喃醛为商品化来源的高纯度5-羟甲基糠醛或糠醛或通过果糖、果葡糖浆脱水后制备的5-羟甲基糠醛粗品。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述磷酸盐缓冲液中还含有乙酸乙酯或乙酸乙烯酯。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述乙酸乙酯或乙酸乙烯酯的体积百分含量为5~20%。
8.根据权利要求1-7任意一项所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述重组菌的浓度为20~100mg/mL。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述辅底物为葡萄糖;所述辅底物的摩尔浓度为呋喃醛摩尔浓度的2±0.5倍,所述碳酸钙的摩尔浓度为呋喃醛摩尔浓度的1.5±0.5倍。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述反应的pH为6~8;反应温度为20~35℃,反应时间为10min~25h。
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