[发明专利]菌株及其在发酵产泰乐菌素中的应用

权利要求书

1.基因在发酵产泰乐菌素或构建产泰乐菌素的链霉菌中的应用，其特征在于，

所述基因包括：强启动子、tylR基因和tylS基因；

所述tylR基因的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示；

所述tylS基因的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示。

2.依据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述强启动子为P_hrdB启动子、P_ermE*启动子或P_kasO*启动子；

所述P_kasO*启动子的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.4所示。

3.依据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述链霉菌为弗氏链霉菌ATCC 19609或弗氏链霉菌tylQ基因阻断突变株。

4.依据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述弗氏链霉菌tylQ基因阻断突变株为将弗氏链霉菌ATCC 19609的tylQ基因敲除；

所述tylQ基因的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.3所示。

5.工程菌的构建方法,其特征在于，将质粒pSET152-RSOE导入链霉菌中；

所述质粒pSET152-RSOE的构建方法是将质粒pSET152-SOE酶切片段和质粒pSET152-ROE酶切片段连接；

所述酶为限制性内切酶EcoR I和EcoR V；

所述连接为T4 DNA连接酶进行连接。

6.依据权利要求5所述工程菌的构建方法,其特征在于，

所述质粒pSET152-SOE的构建方法是利用限制性内切酶EcoR I对质粒pSET152进行线性化后，与以质粒pSET152::D-C为模板、利用引物EcoRV-PkasO-F和kasOp2进行PCR扩增的DNA片段，和以弗氏链霉菌ATCC 19609的基因组为模板、利用引物PkasO-tylS-F和EcoRI-tylS-R进行PCR扩增得到的DNA片段，进行Gibson组装。

7.依据权利要求5所述工程菌的构建方法,其特征在于，所述质粒pSET152-ROE的构建方法是利用限制性内切酶EcoR I和EcoR V对质粒pSET152进行线性化后，与以质粒pSET152::D-C为模板、利用引物152-PkasO(S)-F和kasOp2进行PCR扩增的DNA片段，和以弗氏链霉菌ATCC 19609的基因组为模板、利用引物PkasO-tylR-F和EcoRI-tylR-R进行PCR扩增得到的DNA片段，进行Gibson组装。

8.依据权利要求5所述工程菌的构建方法,其特征在于，所述弗氏链霉菌包括弗氏链霉菌ATCC 19609和弗氏链霉菌tylQ遗传阻断突变株WT/QKO。

9.依据权利要求8所述工程菌的构建方法,其特征在于，所述突变株WT/QKO的构建方法是将弗氏链霉菌ATCC 19609中的tylQ基因敲除。

10.权利要求1所述的应用，其特征在于，所述泰乐菌素为泰乐菌素A、泰乐菌素C中一种或多种。