[发明专利]抗AAV5抗体及快速AAV5滴度测定ELISA试剂盒

权利要求书

1.一种抗AAV5抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含以下3个CDR：

SEQ ID NO:3所示的H-CDR1；

SEQ ID NO:4所示的H-CDR2；

SEQ ID NO:5所示的H-CDR3；以及

所述轻链可变区包含以下3个CDR：

SEQ ID NO:6所示的L-CDR1；

序列如LAS所示的L-CDR2；

SEQ ID NO:7所示的L-CDR3。

2.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体的重链可变区包含如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或与其具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。

3.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体的轻链可变区包含如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，或与其具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。

4.一种重组抗体，其特征在于，所述的重组抗体具有：

(i)如权利要求1所述的抗AAV5抗体或其抗原结合片段的序列；以及

(ii)任选的促进抗体分泌表达的信号肽和/或纯化、检测的标签序列。

5.一种抗体偶联物，其特征在于，所述抗体偶联物包含：

(a)如权利要求1-3任一项所述的抗AAV5抗体或其抗原结合片段或如权利要求4所述的重组抗体；和

(b)偶联部分，所述偶联部分包括：可检测标记物、或酶。

6.如权利要求1-3任一项所述抗AAV5抗体或其抗原结合片段、如权利要求4所述的重组抗体或如权利要求5所述的抗体偶联物在制备用于检测AAV5病毒颗粒/AAV5载体的检测试剂、检测板或试剂盒中的用途。

7.一种检测试剂，所述检测试剂包括：如权利要求1-3任一项所述的抗AAV5抗体或其抗原结合片段、如权利要求4所述的重组抗体或如权利要求5所述的抗体偶联物；以及检测学上可接受的载体或赋形剂。

8.一种检测板，所述检测板的检测表面上包被有如权利要求1-3任一项所述抗AAV5抗体或其抗原结合片段、如权利要求4所述的重组抗体或如权利要求5所述的抗体偶联物。

9.一种试剂盒，所述试剂盒包含如权利要求1-3任一项所述的抗AAV5抗体或其抗原结合片段、如权利要求4所述的重组抗体或如权利要求5所述的抗体偶联物作为抗体试剂。

10.一种测定样品中AAV5病毒颗粒/AAV5载体滴度的方法，所述方法为ELISA法，其包括以下步骤：

(S1)将捕获抗体包被于ELISA板的检测孔中，所述捕获抗体为如权利要求1-3任一项所述的抗AAV5抗体或其抗原结合片段；

(S2)将待测样品或梯度稀释的标准品加入到(S1)的ELISA板的检测孔中，于37±2℃恒温震荡反应15-60分钟，较佳地，20-30分钟；

(S3)洗板后，在检测孔中加入检测抗体，所述检测抗体为如权利要求5所述的抗体偶联物,于37±2℃恒温震荡反应15-60分钟，较佳地，20-30分钟，从而形成捕获抗体-AAV5病毒颗粒/AAV5载体-检测抗体复合物；

(S4)洗板后，检测各检测孔中所述捕获抗体-AAV5病毒颗粒/AAV5载体-检测抗体复合物的形成。