[发明专利]一种用于人血清和血浆中全谱脂溶性维生素及其代谢物检测的试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种血液样本前处理方法，其特征在于，包括：依次使用水和60%-80%V/V的甲醇水溶液对SPE板上的样品进行淋洗；吹干柱床后再用甲基叔丁基醚对样品进行洗脱；洗脱液吹干后使用甲醇复溶。

2.根据权利要求1所述的血液样本前处理方法，其特征在于，所述的水和甲醇的用量体积比为1：1。

3.根据权利要求1所述的血液样本前处理方法，其特征在于，所述的吹干柱床的具体操作为：真空度10-15mmHg吹1-3min。

4.根据权利要求1所述的血液样本前处理方法，其特征在于，所述的固相萃取板包括甲醇和超纯水预处理步骤，所述的甲醇和超纯水的用量体积比1：1。

5.根据权利要求1-4任一项所述的血液样本前处理方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）吸取300µL血液样品至EP管中；

（2）加入60-80µL混合内标工作液；涡旋混合1min后并高速离心分离20s；

（3）然后分别在（2）的样本中加入750-900µL乙腈，涡旋5min；高速离心5min；

（4）依次使用甲醇和超纯水预处理固相萃取板；

（5）从（3）离心好的样本中取0.8-1.0 mL上清液至（4）预处理后的固相萃取板中；

（6）依次使用超纯水和60-80%甲醇水溶液对固相萃取板进行清洗；真空度10-15mmHg吹2min左右吹干为止；

（7）最后使用0.9-1.1mL MTBE将目标物从固相萃取板上洗脱到离心管中；

（8）将洗脱液用氮吹仪吹干，在氮吹干的样本中加入70-90µL甲醇复溶，混匀，高速离心5 min。

6.根据权利要求5所述的血液样本前处理方法，其特征在于，所述的步骤（1）血液样品为血浆或血清；所述的步骤（2）中混合内标工作液与血液样品的用量比为1：4；所述的步骤（3）乙腈与血液样品的用量比为11：4。

7.甲醇和甲基叔丁基醚作为样本前处理试剂在制备用于人血清和血浆中全谱脂溶性维生素及其代谢物检测的试剂盒中的应用。

8.一种用于人血清和血浆中全谱脂溶性维生素及其代谢物检测的试剂盒，包括样本前处理试剂，其特征在于，所述的前处理试剂中包括：水、使用浓度为60%-80%V/V的甲醇水溶液和甲基叔丁基醚。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，还包括色谱流动相A；所述的流动相A为包括氟化铵的水溶液；所述的流动相A中氟化铵与超纯水的比例为1：1600-1：2400n/V。

10.根据权利要求8-9任一项所述的试剂盒，其特征在于，还包括标准品或质控品。