[发明专利]鉴定烟草黑胫病0号生理小种的引物对及其应用在审
| 申请号： | 202310324489.7 | 申请日： | 2023-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN116200533A | 公开（公告）日： | 2023-06-02 |
| 发明（设计）人： | 王文静;王凤龙;曹毅;方敦煌 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院烟草研究所（中国烟草总公司青州烟草研究所） |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 | 代理人： | 韩丽萍 |
| 地址： | 266000 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鉴定 烟草 黑胫病 生理 引物 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于鉴定烟草黑胫病0号生理小种的引物对，其特征在于，其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.一种鉴定烟草黑胫病0号生理小种的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所示的引物对。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含PCR缓冲液、聚合酶、dNTP Mix及ddH20。
4.一种鉴定烟草黑胫病0号生理小种的方法，其特征在于，包括如下步骤：提取待鉴定样本的基因组DNA作为模板，利用权利要求1所述的引物对对基因组DNA中的基因片段HJ0进行PCR扩增，HJ0的碱基序列如SEQ ID NO:3所示；对扩增产物进行检测，若出现167bp的DNA条带，则待测样本为0号生理小种。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，PCR扩增反应条件为：94℃变性1min；而后进行35个循环，每个循环包括94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸30s；最后72℃延伸10min；4℃保温。
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