[发明专利]一种单萜吲哚类生物碱及其制备方法、用途

说明书

本发明提供一种单萜吲哚类生物碱及其制备方法、用途，属于天然产物提取技术领域。该单萜吲哚类生物碱提取分离自马钱子，其化学结构式如式Ⅰ所示。经鉴定，该化合物为protostrychnine型生物碱，分子式为Csubgt;21/subgt;Hsubgt;25/subgt;Nsubgt;2/subgt;Osubgt;3/subgt;。经细胞实验验证，本发明提供的化合物protostrychnineA能够显著降低RAW264.7细胞上清液分泌的TNF‑α、IL‑1、IL‑6和NO的浓度，表明其具有较佳的抗炎活性，

技术领域

本发明涉及天然产物提取技术领域，具体涉及一种单萜吲哚类生物碱及其制备方法、用途。

背景技术

马钱子，是马钱科马钱属植物马钱(Strychnos nux-vomica L.)的干燥种子，又名番木鳖、苦实等。主产于印度、越南、缅甸等国，我国的云南、广东、广西等地为主要栽培区。其药用部位为马钱的干燥种子，即药用马钱子，马钱子作为中药始载于《本草纲目》，谓之“状似马之连钱，故名马钱”。马钱子性寒、味苦、有剧毒，具有通筋活络、祛风除湿、散结消肿等疗效。现代临床常以马钱子治疗类风湿性关节炎、中风偏瘫、神经麻痹、多发性神经炎等疾病，是具有较大开发潜力的中药，尤其在治疗恶性肿瘤方面，效果明显且没有其它抗癌药常有的骨髓抑制、免疫抑制等不良反应，因而具有非常广阔的开发前景。

现代医学研究证明马钱子中发挥药理作用的为其结构特定的单萜吲哚类生物碱，但对马钱子中的单萜吲哚类生物碱的定向分离却没有形成一个完整的体系，且大量关于药理作用、制剂及临床应用的研究仍停留在马钱子总生物碱的水准上。因此，对马钱子中单萜吲哚类生物碱成分的深入研究是十分必要的。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种从马钱子中提取分离得到的新单萜吲哚类生物碱及制备方法，该化合物结构新颖、抗炎活性佳，且其制备方法成本低廉，操作简单，能够分离得到较高纯度的化合物。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

本发明提供一种单萜吲哚类生物碱，其化学结构式如式Ⅰ所示：

本发明还提供一种所述单萜吲哚类生物碱的制备方法，包括以下步骤：

S1、将马钱子用体积分数为80～95％乙醇溶液回流提取，收集提取液；

S2、将所述提取液调pH至1～3，用氯仿萃取，收集酸水液；

S3、将所述酸水液调pH至9～12，依次用氯仿和正丁醇萃取，得到正丁醇萃取物；

S4、将所述正丁醇萃取物溶解后，用二氯甲烷-甲醇-二乙胺洗脱系统经硅胶柱梯度洗脱，对流出液进行薄层色谱检测，合并主斑点相同的馏分，得到四个馏分，分别为Fr.A、Fr.B、Fr.C、Fr.D；

S5、将所述Fr.B溶解后，用甲醇-水洗脱系统经ODS柱进行梯度洗脱，对流出液进行薄层色谱检测，合并主斑点相同的馏分，得到三个馏分，分别为Fr.B₁、Fr.B₂、Fr.B₃；

S6、将所述Fr.B₃溶解后，用二氯甲烷-甲醇-二乙胺经正向硅胶柱进行等度洗脱，对流出液用薄层色谱法检测，合并主斑点相同的馏分，得到四个馏分，分别为Fr.B_3-1、Fr.B_3-2、Fr.B_3-3、Fr.B_3-4；

S7、将所述Fr.B_3-1溶解后，过滤，用甲醇-水-氨水洗脱系统经高效液相色谱柱进行等度洗脱，收集含有单萜吲哚类生物碱的流出液，即得所述单萜吲哚类生物碱。

优选地，S1中，马钱子与乙醇溶液的用量比为1g：6～10mL。