[发明专利]小麦抗白粉病基因PmYF267的KASP分子标记、检测方法及应用

说明书

本发明公开了一种小麦抗白粉病基因PmYF267的KASP分子标记、检测方法及应用，属于分子育种技术领域。与小麦抗白粉病基因PmYF267紧密连锁的KASP分子标记为7AK‑685和7AK‑697，上述两个分子标记与小麦抗白粉病基因PmYF267共定位于小麦7A染色体长臂上，并与PmYF267共分离。相较于常规的分子标记，本发明提供分子标记不仅可以高效、准确、高通量的检测PmYF267的遗传作图群体，应用于PmYF267的定位和克隆，以及高通量的分子标记辅助选择，实现短时间内育种大群体中抗病基因PmYF267的高通量筛选，可有效提高小麦抗白粉病分子育种效率。

技术领域

本发明属于小麦分子生物技术及育种应用领域，具体涉及一种用于检测小麦抗白粉病基因PmYF267的KASP分子标记、检测方法及应用。本发明可为小麦抗白粉病育种提供新的基因资源；与PmYF267紧密连锁的KASP分子标记可用于抗白粉病基因的分子标记辅助选择育种。

背景技术

小麦是我国三大粮食作物之一，小麦优质绿色高产对保障国家粮食安全和农业可持续发展具有重大现实和战略意义。小麦白粉病是由禾本科布氏白粉菌小麦专化型(Blumeria graminis f.sp.tritici,Bgt)引起的一种真菌性病害，会导致小麦叶片枯萎、容易倒伏、籽粒灌浆不足和品质劣化，已成为我国小麦生产的主要病害。随着高氮、密植等栽培模式的变化以及高温、多雨的气候变化，小麦白粉病危害程度加剧。实践证明，选育和利用抗病品种是防治小麦白粉病的经济有效途径。

挖掘和鉴定抗病基因是培育抗白粉病品种的关键。尽管已报道的小麦抗白粉病基因位点有很多，但可实际用于抗病育种的抗源却很少。一方面是由于很多抗病基因源于小麦近缘物种，抗病基因导入小麦背景的同时会携带一些外源冗余基因，往往会对小麦农艺和品质性状带来不利影响。另一方面，大多数抗病基因都是病原菌生理小种专化抗性，长期大面积利用单一抗源会加速病原菌优势小种的变异，导致抗病基因抗性丧失。在我国，Pm2、Pm4、Pm8等基因在各大麦区均有不同程度的抗性丧失，特别是Pm8抗性丧失导致小麦白粉病又一轮爆发。在长江中下游麦区以及西南麦区，利用Pm21培育的抗病品种激增，存在过度利用的风险。因此，不断挖掘新的抗病基因并解析其作用机制，对于合理利用抗源和拓宽小麦遗传基础都具有重要意义。

得益于麦类作物基因组学的快速发展，普通小麦、乌拉尔图小麦、节节麦、野生二粒小麦、硬粒小麦等麦类作物基因组测序工作相继完成，同时也促进了小麦SNP(Singlenucleotide polymorphism)芯片高通量测序技术的发展，极大推进了小麦功能基因的挖掘工作。丰富的SNP位点信息，大大推动了DNA变异检测及分子标记开发的效率，尤其是以SNP为基础的第三代KASP(Kompetitive Allele Specific PCR，KASP)分子标记。KASP技术是基于PCR过程中引物末端碱基特异性匹配来实现SNP/Indel(Insertion-deletion)分型的方法，能够精确地进行双等位基因分型，可避免传统分子标记繁琐的筛选过程，具有高效率、高通量等优势，为基因挖掘、克隆及分子标记辅助育种提供了极大便利。

‘扬YF267’是江苏里下河地区农业科学研究所选育的优质高产多抗小麦新品系，其全生育期对当地的混合白粉菌株表现免疫。高感白粉病的‘扬09DPBZ-2’也是由江苏里下河地区农业科学研究所选育的优质强筋小麦品系。利用扬09DPBZ-2和扬YF267配制杂交组合，构建了大规模遗传分离群体。通过极端抗、感混池外显子捕获测序分析，在7A染色体上检测到1个主效抗白粉病基因，定名为“PmYF267”，该位点来源于抗白粉病亲本扬YF267。因此，开发PmYF267的紧密连锁标记，对提高该基因在小麦白粉病抗性育种中的选择效率具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种来自普通小麦品系‘扬YF267’的抗白粉病基因PmYF267，该基因可为小麦抗白粉病育种提供新的基因资源。

本发明的另一个目的在于提供与PmYF267紧密连锁的KASP分子标记。