[发明专利]基于荧光成像的扫描仪对焦方法在审
| 申请号: | 202310206313.1 | 申请日: | 2023-03-03 |
| 公开(公告)号: | CN116560060A | 公开(公告)日: | 2023-08-08 |
| 发明(设计)人: | 梅园 | 申请(专利权)人: | 上海申挚医疗科技有限公司 |
| 主分类号: | G02B21/00 | 分类号: | G02B21/00;G02B21/24 |
| 代理公司: | 上海海钧知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 31330 | 代理人: | 姜波;许兰 |
| 地址: | 200080 上海市虹口区海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 基于 荧光 成像 扫描仪 对焦 方法 | ||
1.基于荧光成像的扫描仪对焦方法,其特征在于,所述对焦方法包括如下方法步骤:
S101、控制载物台沿指定方向按照第一步长值移动;
S102、载物台每移动一步,针对载物台上承载的玻片,采集一幅荧光显微图像,计算每一幅荧光显微图像的对焦评价值,并记录对应的载物台的位置信息;
S103、在载物台从初始位置开始移动,若检测到后一幅荧光显微图像的对焦评价值减去前一幅荧光显微图像的对焦评价值的差值为负值,则调整移动方向为指定方向的反方向;
S104、判断后一幅荧光显微图像的对焦评价值减去前一幅荧光显微图像的对焦评价值的差值是否为负值;若是,则执行步骤S105,进行焦距细调,若否,则执行步骤S108,继续沿指定方向的反方向移动;
S105、在最后一幅荧光显微图像对应的载物台的位置与前一幅荧光显微图像对应的载物台的位置之间的位置区间内,载物台按照第二步长值移动进行扫描,获取至少三幅荧光显微图像,计算每一幅荧光显微图像的对焦评价值,并记录对应的载物台的位置信息,其中,第二步长值小于第一步长值;
S106、从所有荧光显微图像的对焦评价值中确定最大对焦评价值;
S107、根据最大对焦评价值对应的荧光显微图像对应的载物台的位置信息进行调焦,以使载物台位于最大对焦评价值对应的荧光显微图像对应的载物台的位置,完成对焦;
S108、继续沿指定方向的反方向移动。
2.根据权利要求1所述的对焦方法,其特征在于,在步骤S101中,所述指定方向为朝向扫描仪物镜的方向,或者背向扫描仪物镜的方向。
3.根据权利要求1所述的对焦方法,其特征在于,在步骤S102中,载物台的位置信息为载物台从初始位置移动至当前位置的位移。
4.根据权利要求1所述的对焦方法,其特征在于,在步骤S103中,载物台从初始位置开始移动,首次连续移动两步采集一幅荧光显微图像,之后每移动一步采集一幅荧光显微图像。
5.根据权利要求1所述的对焦方法,其特征在于,在步骤S102和步骤S105中,计算每一幅荧光显微图像的对焦评价值的算法为Brenner梯度函数、Laplacian梯度函数、灰度方差、灰度方差乘积、方差函数、能量梯度函数、Vollath函数和熵函数的一种。
6.根据权利要求1或5所述的对焦方法,其特征在于,所述对焦评价值为荧光显微图像的清晰度或者荧光显微图像的对比度。
7.基于荧光成像的扫描仪对焦方法,其特征在于,所述对焦方法包括如下方法步骤:
S201、对扫描仪的载物台的位置进行初始化,使载物台位于扫描仪坐标系的0点;
S202、控制载物台沿朝向物镜的方向按照第一步长值移动;
S203、每移动一步,针对载物台上承载的玻片,采集一幅荧光显微图像,计算每一幅荧光显微图像的对焦评价值,并记录对应的载物台的位置信息;
S204、在载物台移动的过程中,判断后一幅荧光显微图像的对焦评价值减去前一幅荧光显微图像的对焦评价值的差值是否为负值;若是,则执行步骤S205,进行焦距细调,若否,则执行步骤S208,继续沿着朝向物镜的方向移动;
S205、在最后一幅荧光显微图像对应的载物台的位置与前一幅荧光显微图像对应的载物台的位置之间的位置区间内,载物台按照第二步长值移动进行扫描,获取至少三幅荧光显微图像,计算每一幅荧光显微图像的对焦评价值,并记录对应的载物台的位置信息,其中,第二步长值小于第一步长值;
S206、从所有荧光显微图像的对焦评价值中确定最大对焦评价值;
S207、根据最大对焦评价值对应的荧光显微图像对应的载物台的位置信息进行调焦,以使载物台位于最大对焦评价值对应的荧光显微图像对应的载物台的位置,完成对焦;
S208,继续沿着朝向物镜的方向移动。
8.根据权利要求7所述的对焦方法,其特征在于,在步骤S201中,载物台位于扫描仪坐标系的0点时,载物台与物镜的距离最远。
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