[发明专利]一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明公开一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用，属于微生物技术领域。本发明提供的纺锤形赖氨酸芽孢杆菌，命名为KBD‑5，该菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.26146，保藏日为2022年11月14日。所述KBD‑5菌株，对烟草花叶病毒具有优异的抑制活性，且具有较好的无机硒还原能力，同时还能够促进植物的生长发育，因此，可将KBD‑5菌株制备成菌剂或者纳米硒活性菌液，用于植物抗病性研究，具有显著的应用价值。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其应用。

背景技术

烟草花叶病毒，简称TMV，为RNA病毒，是烟草花叶病等的病原体，是烟草生产上分布最广、发生最为普遍的一类病害，对烟草的危害极大。烟草花叶病毒侵染烟草植株后，会破坏植株的组织结构，对嫩叶的破坏力度最大，使嫩叶出现明脉症状，即叶片侧脉及支脉组织出现半透明的现象，烟草花叶病毒在烟草细胞中大量繁殖，病毒RNA会严重影响烟草细胞的正常分裂，导致烟草叶肉细胞畸形裂变，部分烟草叶片大量繁殖或者受抑制，出现叶片厚度不均匀的症状，叶片出现斑点，呈现出黄绿相间的不同区域，随着花叶病毒的进一步侵染，逐步导致叶片组织坏死，烟草叶片出现大面积的褐色坏死斑，叶片形状扭曲、皱缩，这种现象在老叶片上尤为明显，重病的叶片凸起形成泡状，边缘向内弯曲。早期发病的烟草植株，严重矮化，烟草植株不能正常生长，在成熟期不能正常的开花结果，抵抗能力很差，容易受到外界的干扰，叶片和花果容易脱落，种子量少，一般不能正常发芽生长。

发明内容

本发明提供了一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌，命名为KBD-5，该菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.26146，保藏日为2022年11月14日。

上述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5对烟草花叶病毒具有优异的抑制活性，因此，可将其应用于由烟草花叶病毒引起的植物性病害的预防和/或治疗，具体地，可将上述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5制备成微生物制剂，以预防和/或治疗由烟草花叶病毒引起的植物性病害，例如烟草花叶病。

本发明提供了一种微生物制剂，含有上述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5。

在对纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5的研究中，我们发现，KBD-5对硒元素具有较强的还原和转化能力，其可以将无机硒转化为硒单质。为此，本发明还提供了上述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5在无机硒还原或硒单质制备中的应用。

本发明提供了一种纳米硒活性菌液的制备方法，步骤如下：

将上述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5菌液接种于含无机硒的培养基中，在适宜的条件下培养，至菌液中富集有红色物质，无机硒被还原为红色单质纳米硒，稀释菌液，获得纳米硒活性菌液。

上述纳米硒活性菌液的制备方法中，纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5菌液的接种量为1％，其中，菌液中纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5的含量≥10⁸cfu/mL。

上述纳米硒活性菌液的制备方法中，培养基可选自液体培养基，例如LB液体培养基等。

在本发明中，适宜纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5生长和繁殖的温度条件为28～37℃，优选为30℃。在培养过程中，也可选择震荡培养，振荡速率应当适宜纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5，例如可以是150rpm。

具体地，所述纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5菌液可由如下方法制备而成：

将纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5菌株接种到LB固体培养基上进行纯化，挑取生长良好的单一菌落接种于LB液体培养基中，在30℃、150rpm条件下振荡培养，得到纺锤形赖氨酸芽孢杆菌KBD-5发酵菌液。

上述纳米硒活性菌液的制备方法中，菌液的稀释按需求进行稀释即可。