[发明专利]一种化合物在制备NGLY1抑制剂中的应用及NGLY1抑制剂筛选方法

说明书

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种化合物在制备NGLY1抑制剂中的应用及NGLY1抑制剂筛选方法。本发明首次发现当化合物中含有由通过糖苷键或‑CHsubgt;2/subgt;‑O‑键相连的鼠李糖基和葡萄糖基构成的二糖单元时，能够用于制备NGLY1抑制剂，这能为抗肿瘤和抗病毒药物的研发奠定基础。此外，本发明的NGLY1抑制剂筛选方法中，基于模拟分子对接的预测结果具有较高的准确性，能够减小后续实验验证的盲目性和工作量。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种化合物在制备NGLY1抑制剂中的应用及NGLY1抑制剂筛选方法。

背景技术

人N-糖蛋白去糖基化酶NGLY1(N-Glycanase 1，NGLY1；或Peptide-N-Glycanase，PNGase)，是一种人体中重要的去糖基化酶，可水解糖蛋白上共价连接的所有N-糖肽链，在释放出完整的寡糖链的同时，将肽链上的天门冬酰胺(Asn)转变为天门冬氨酸(Asp)。NGLY1在体内参与内质网相关降解途径(endoplasmic reticulum associated proteindegradation，ERAD)，使错误折叠的糖蛋白去糖基化，从而促进蛋白的降解。

根据The human protein数据库显示，NGLY1在部分肿瘤细胞中高表达。对NGLY1高表达的肿瘤细胞内的NGLY1基因进行敲降或用NGLY1抑制剂处理，会导致细胞出现收缩、碎裂和脱离等凋亡的形态特征。例如，NGLY1在黑色素瘤等肿瘤细胞中高表达，用Z-VAD-FMK处理黑色素瘤细胞后，NGLY1的活性明显下降，并且出现细胞凋亡现象，同样在黑色素瘤小鼠模型体内发现敲降NGLY1会阻碍黑色素瘤的生长。同时，抑制NGLY1后，可阻止转录因子NRF1(Nuclear Factor Erythroid 2Like 1,NFE2L1,NRF1)的激活，增加蛋白酶体抑制剂类药物的细胞毒性，从而抑制白血病细胞的生长。上述结果显示，NGLY1的表达水平可能与肿瘤存在关联，调控体内NGLY1活性可能成为肿瘤治疗的新方向。此外，NGLY1敲除的人单核细胞THP-1内干扰素刺激基因(ISGs)表达上调，激活机体固有免疫信号，可以抵抗病毒感染。因此，NGLY1抑制剂在诱导癌细胞特异性凋亡、开发新的抗癌方法以及抗病毒感染中具有重要意义。

但目前，关于NGLY1的活性机制尚未研究透彻，已报道的NGLY1抑制剂较少。开发更多的NGLY1抑制剂，能够为抗肿瘤和抗病毒药物的研发奠定基础。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种化合物在制备NGLY1抑制剂中的应用。本发明首次发现当化合物中含有由通过糖苷键或-CH₂-O-键相连的鼠李糖基和葡萄糖基构成的二糖单元时，能够用于制备NGLY1抑制剂，这能为抗肿瘤和抗病毒药物的研发奠定基础。

本发明还提供了一种NGLY1抑制剂的筛选方法。在该筛选方法中，基于模拟分子对接的预测结果具有较高的准确性，能够减小后续实验验证的盲目性和工作量。

本发明的具体技术方案为：

第一方面，本发明提供了一种化合物在制备NGLY1抑制剂中的应用，所述化合物中含有至少一个二糖单元，所述二糖单元由通过糖苷键或-CH₂-O-键相连的鼠李糖基和葡萄糖基构成。

本发明发现，当化合物中含有由通过糖苷键或-CH₂-O-键相连的鼠李糖基和葡萄糖基构成的二糖单元时，能够与人N-糖蛋白去糖基化酶(NGLY1)较好地结合，并有效抑制NGLY1的活性，因此，具有上述结构的化合物能够用于制备NGLY1抑制剂。

作为优选，所述化合物为芸香糖、柴胡皂苷或大豆皂苷。

芸香糖中含有鼠李糖基和葡萄糖基，且这两个糖基之间通过-CH₂-O-键相连。

柴胡皂苷中含有鼠李糖基和葡萄糖基，且这两个糖基之间通过糖苷键相连。