[发明专利]单细胞表面淀粉/CMC自组装壳层材料的制备方法在审
申请号: | 202310151497.6 | 申请日: | 2023-02-22 |
公开(公告)号: | CN116334063A | 公开(公告)日: | 2023-06-27 |
发明(设计)人: | 贺斌;方一帆;朱兴;王科尧;郑旭磊;张素风 | 申请(专利权)人: | 陕西科技大学 |
主分类号: | C12N11/12 | 分类号: | C12N11/12;C12N11/10;C12N11/04;C12R1/19 |
代理公司: | 西安弘理专利事务所 61214 | 代理人: | 罗笛 |
地址: | 710021 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 单细胞 表面 淀粉 cmc 组装 材料 制备 方法 | ||
1.单细胞表面淀粉/CMC自组装壳层材料的制备方法,其特征在于:具体包括如下步骤:
步骤1,制备阳离子型淀粉Q+;
步骤2,取细胞置于PBS缓冲液中,再按照质量比细胞:Q+=1:2加入Q+,室温条件下持续搅拌30~40min,经过离心洗涤后,倒去上清液后得到表面涂覆一层Q+的细胞cell/Q+;
步骤3,将步骤2中制得的酵细胞于PBS中分散,再按照质量比细胞:CMC=1:0.5加入CMC,室温条件下持续搅拌30~40min,经过离心洗涤后,倒去上清液后得到表面涂覆有一层Q+和一层CMC的细胞cell/Q+/CMC;
步骤4,将步骤3中制得的细胞于PBS中分散,再按照质量比细胞:Q+=1:2加入Q+,室温条件下持续搅拌30~40min,经过离心洗涤后,倒去上清液后得到表面涂覆有一层Q+、一层CMC和一层Q+的细胞cell/Q+/CMC/Q+;
步骤5,对步骤4所得的细胞进行处理,即得。
2.根据权利要求1所述的单细胞表面淀粉/CMC自组装壳层材料的制备方法,其特征在于:所述步骤1的具体过程为:
将2,3-环氧丙基三甲基氯化铵GTA和NaOH分别溶解于去离子水中,然后,将GTA溶液和NaOH溶液混合,并将混合物逐滴滴入含有支链淀粉和去离子水的圆底烧瓶中,搅拌均匀;将最终反应溶液用去离子水透析2~3天,经过冷冻干燥得到季铵化淀粉Q+。
3.根据权利要求1所述的单细胞表面淀粉/CMC自组装壳层材料的制备方法,其特征在于:所述步骤5的具体过程为:
将步骤4中制得的细胞于PBS中分散,再按照质量比细胞:CMC=1:0.5加入CMC,室温条件下持续搅拌30~40min,经过离心洗涤后,倒去上清液后得到表面涂覆有一层Q+、一层CMC、一层Q+和一层CMC的细胞cell/Q+/CMC/Q+/CMC。
4.根据权利要求1所述的单细胞表面淀粉/CMC自组装壳层材料的制备方法,其特征在于:所述步骤5的具体过程为:步骤4所得的细胞表面形成三层Q+/CMC/Q+后,在最外层使用海藻酸盐ALG与CMC按照质量比1:0.4复配后进行吸附包埋,最后使用Ca2+对最外层进行固化,即得。
5.根据权利要求4所述的单细胞表面淀粉/CMC自组装壳层材料的制备方法,其特征在于:所述步骤5的具体过程为:
步骤5.1,将步骤4中制得的细胞于PBS中分散,再按照质量比细胞:CMC-ALG=1:0.5加入CMC-ALG,室温条件下持续搅拌30~40min,经过离心洗涤后,倒去上清液后得到表面涂覆有一层Q+、一层CMC、一层Q+和一层CMC-ALG的细胞cell/Q+/CMC/Q+/CMC-ALG;
步骤5.2,将步骤5.1中制得的细胞于无水Cacl2中分散并持续搅拌15~20min,经过离心洗涤后,倒去上清液后得到壳层固化后的细胞cell/Q+/CMC/Q+/CMC-ALGCa2+。
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