[发明专利]基于响应面法优化的瑶药六方藤总皂苷的提取方法及其应用

说明书

本发明公开了一种基于响应面法优化的瑶药六方藤总皂苷的提取方法及其应用，本发明利用响应面法对六方藤总皂苷的提取工艺进行优化，得到了一种瑶药六方藤总皂苷的方法，该提取方法为：将六方藤药材进行粉碎，得六方藤粉末，然后加入乙醇进行超声提取，提取工艺条件为：提取温度为65℃～70℃，乙醇体积浓度在70%～80%，提取时间：120min～150min，料液比为1g∶25‑30 mL。该提取方法工艺稳定、操作简单、重复性良好、可行、提取效率较高，成本低，六方藤总皂苷得率高。本发明还测定了所得的六方藤总皂苷的抗氧化活性，结果显示：六方藤总皂苷对DPPH自由基有一定的抑制清除作用，且具有一定的还原能力；为六方藤的进一步开发利用提供了理论基础。

技术领域

本发明属于总皂苷的提取技术领域，具体涉及一种基于响应面法优化的瑶药六方藤总皂苷的提取方法及其应用。

背景技术

六方藤（ Cissus hexangularisThorel ex Planch.）为葡萄科白粉藤属藤本植物，又名方茎宽茎藤、翅茎白粉藤、六方钻等，分布于广西、福建、广东、海南等地，以藤入药，晒干或鲜用。味辛、微苦，性凉，归肝、肾经，具有祛风活络、散瘀活血功能。主治风湿关节痛，腰肌劳损，跌打损伤，是瑶族习用药材，六方藤为瑶药“虎牛钻风”中的六方钻。已被收录于2014版《广西壮族自治区瑶药材质量标准（第一卷）》，瑶药名：落帮准，瑶医多用于崩闭闷（风湿性关节痛)，改闷（腰痛，腰肌劳损），播冲（跌打损伤）及眸名肿毒（痈疮肿毒）。

六方藤化学成分复杂，含有黄酮类、皂苷类、糖类、酚类、蒽醌类、香豆素、强心苷、甾萜类、生物碱及挥发油等化学成分。现代药理学研究表明白粉藤属植物具有多种潜在的抗菌、抗炎、抗氧化、抗过敏、抗肿瘤、拮抗内皮素和蛇毒、治疗糖尿病等多种生物活性。但近年来对六方藤的研究主要集中在所含有的化学成分上，而对六方藤提取工艺、抗氧化活性方面的研究几乎为空白。皂苷是天然产物化学库的重要组成之一，具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗炎、免疫调节、抗病毒、抗真菌、保肝活性等。许多中草药如人参、远志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。大量研究表明，皂苷在祛痰、止咳、镇静、解热、抗菌、抗癌、调节机体代谢及免疫、治疗心血管疾病和糖尿病等方面具有良好的功效。但目前有关于瑶药六方藤中总皂苷的提取工艺方面的研究报道几乎没有，关于采用响应面法优化瑶药六方藤总皂苷提取工艺及其抗氧化活性方面的研究也尚未见有相关的报道。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足而提供的一种基于响应面法优化的瑶药六方藤总皂苷的提取方法及其应用。本发明利用响应面法进行优化瑶药六方藤总皂苷的提取工艺，所得到的六方藤总皂苷提取方法稳定、操作简单、重复性良好、可行、总皂苷得率高，而且本发明通过体外抗氧化试验测六方藤总皂苷对 DPPH 自由基清除率，结果表明所提取得到的六方藤总皂苷具有较好的抗氧化作用，为六方藤的进一步开发利用提供了理论基础。

为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：

一种基于响应面法优化的瑶药六方藤总皂苷的提取方法，根据Box-Behnken试验设计原理，利用Design-Expert软件设计优化提取瑶药六方藤总皂苷的提取温度、乙醇浓度和提取时间的工艺条件，所述瑶药六方藤总皂苷的提取方法为：将六方藤药材进行粉碎，得六方藤粉末，然后加入乙醇进行超声提取，提取工艺条件为： 提取温度为 65℃～70℃，乙醇体积浓度在70%～80%，提取时间：120min～150min，料液比为1g∶25-30 mL。

优选的，本发明基于响应面法优化的瑶药六方藤总皂苷的提取方法，根据Box-Behnken试验设计原理，利用Design-Expert软件设计优化提取瑶药六方藤总皂苷的提取温度、乙醇浓度和提取时间的工艺条件，得出提取瑶药六方藤总皂苷的最佳提取工艺条件是：提取温度70℃，乙醇体积浓度74%，提取时间150.00min。

进一步的，所述响应面法的具体步骤包括：