[发明专利]一种促进黄曲霉生长及其产毒的实验室培养装置与培养方法

说明书

本发明公开了一种用于在固体基质上培养黄曲霉的实验室培养装置和培养方法，旨在解决难以模拟现实中如干辣椒等固体基质因受潮导致黄曲霉真菌及黄曲霉毒素污染问题。所述培养装置包括水容器、托架、培养皿、传感器、无菌透气膜和恒温培养箱；水容器中的水经过挥发、平衡以及透气膜的密封形成一个相对稳定的环境，从而提供一个高湿高温的培养环境。相较常规培养，采用本发明的培养装置和培养方法，培养时间至少缩短50％以上，产毒水平至少提高5倍。因此，本发明能促进黄曲霉在固体基质生长、产毒，有利于模拟固体基质因自然受潮导致黄曲霉真菌及黄曲霉毒素污染问题。

技术领域

本发明属于微生物培养领域，具体涉及一种黄曲霉在固体基质上快速生长和产黄曲霉毒素的一种实验室培养装置及培养方法。

背景技术

黄曲霉是污染香辛料、坚果和粮油作物等干制品的重要真菌之一，其分泌的黄曲霉毒素具有强烈的致癌、致畸等危害，这对食品乃至全球公共卫生安全构成了重大威胁。防治黄曲霉及毒素污染成为全世界的重要研究课题。然而，在干辣椒、开心果和花生粒等干制品中，通常黄曲霉生长速度较慢，培养数个月也可能不见黄曲霉明显生长，产毒水平低以致于难以用高效色相色谱检测。因此，这对防治黄曲霉及毒素污染的研究造成了困扰。

虽然提高干制品中的含水量或提高培养环境中的相对湿度一定程度可以改善上述问题，比如直接向干制品中添加水或采用恒湿培养箱。然而，现有方法总是存在容易污染杂菌、难以模拟食品自然受潮、难以在同一环境下进行多样本试验、培养复杂和难以控制等问题，例如中国专利CN202898394U公开的《一种黄曲霉发酵培养盘》。具体而言，直接将干制品与水混合可增加样本含水量，但由于干制品受潮过程是一个缓慢的动态过程，因此无法模拟食物自然受潮现象。采用恒湿培养箱，虽然培养环境中的相对湿度有所提高，但是培养物与环境空气直接接触极容易导致杂菌污染，进行大量样本试验难度也增大。此外，黄曲霉培养周期过长将严重影响科学实验进度和成本。

因此，开发一种低成本简易的实验室培养装置与培养方法实现黄曲霉在干制品上快速生长、高效产毒，同时可以模拟食物自然受潮且方便开展多样品试验，就显得十分重要。

发明内容

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种促进黄曲霉生长及其产毒的实验室培养装置，包括：水容器、托架、培养皿、传感器、无菌透气膜和恒温培养箱；

所述水容器内盛放有水；

所述托架设置于水容器内；

所述培养皿通过托架支承于水面上方，其用于盛放固体基质；

所述传感器设置于培养皿内，用于监测黄曲霉培养过程的温度和相对湿度；

所述无菌透气膜用于封住水容器口部，使水容器内外部实现无菌空气交换；

所述恒温培养箱用于为水容器提供恒温环境。

进一步，所述水容器采用容量为250mL的烧杯，其直径为70mm，高度为95mm；所述培养皿采用直径60mm的玻璃培养皿。

进一步，所述托架采用直径50mm，高度40mm的弹簧托。

本发明还提供了一种采用上述实验室培养装置的黄曲霉培养方法，该方法包括以下步骤：

s1.将所述实验室培养装置的各个部件进行灭菌或消毒处理；

s2.对固体基质进行紫外杀菌处理；

s3.制备黄曲霉孢子悬浮液；

s4.将黄曲霉孢子悬浮液接种至盛有固体基质的培养皿中；

s5.采用无菌透气膜封住水容器口部，将水容器置于恒温培养箱中避光培养，采用传感器监测培养皿内的温度和相对湿度；

进一步，灭菌及消毒处理的具体步骤包括：