[发明专利]一种生物肥料的固体发酵方法

权利要求书

1.一种生物肥料的固体发酵方法，其特征在于，它是由下列重量的原料制成：粪肥50-70份，银杏外种皮3-5份，甜叶菊加工废弃物15-30份，苦豆子全草加工废弃物3-6份，沙棘加工废弃物5-10份，蚯蚓加工废弃物3-6份，鳌合肥15-20份，稀土0.01-0.08份，糖2-6份，豆粕5-10份，玉米芯50-100份，复合微生物菌剂3-6份；具体发酵方法是：

（1）将复合生物菌剂除外的其它各种原材料粉碎至70-100目，混合均匀，用食用菌发酵液调节含水量为50-60%，经110℃-115℃灭菌35-40min，冷却至室温后，得到固体培养基;

（2）将上述固体培养基按重量15-20%接种量接入食用菌菌丝体，充分混合后，置于消毒后的发酵浅盘中，表面覆盖塑料薄膜，置于培养发酵室，在23-26℃下发酵22-26天，待菌丝在菌盘长满后，将培养发酵室的温度提升至43-46℃保持3天，使菌丝体自溶和降解，得发酵物料；

（3）将上述发酵物料倾出、摊晾放冷，打碎，加入复合微生物菌剂，搅拌均匀，入库发酵，发酵温度为32-36℃，发酵时间为12-16天，发酵期间每隔2-3d翻堆一次，发酵后的生物肥料经不高于40℃的条件下低温干燥，再加入粉碎机打碎，过筛，经检测，制得粉状生物肥料；或进入制粒机，制成颗粒状，经检测，制成颗粒型生物肥料；

所述的食用菌发酵液及食用菌菌丝体由以下方法步骤制得：

（1）菌种培养

按常规方法，第一步制得斜面培养基：土豆200g，琼脂18-20g，葡萄糖20g，加水至1000ml，PH值自然；

取食用菌鲜菇尚未生长孢子的幼嫩子实体，在无菌操作条件下取谷粒大小的心部组织一块，接种于斜面培养基，将菌种置20-22℃下培养，7-8天后，当菌落长到蚕豆大小时，将培养温度下降至15-16℃，待菌丝长到试管斜面1/2以上时，再移入12-13℃的温度下培养，至长满斜面；

摇瓶种子培养：培养基按牛肉浸膏：蛋白胨：蔗糖：氯化钠=1%：2%：2%：0.5%的配制比例投料；将配料加适量水，加热使溶，再加水使成总液量为重量100%后，用碳酸氢钠溶液调PH至7-7.2，过滤，分装于0.5L三角瓶中，每瓶装量为0.25L，塞好棉塞，用玻璃纸包扎，于1.2-1.3kg/cm²蒸汽压力灭菌30min备用；

经检验合格的试管斜面种子接种于摇瓶，在摇瓶200r/min、培养温度25-27℃，培养7天，得摇瓶种子；

（2）三级发酵培养：培养基按葡萄糖、蚕蛹粉、蛋白胨、硫酸铵、磷酸二氢钾、氯化钠、碳酸钙、硫酸镁（MgSO₄·7H₂O）=2%：1%：1.5%：0.5%：0.15%：0.5%：0.5%：0.075%，消泡剂适量；自然PH值；

一级种子培养，将摇瓶种子接种于种子罐中，在温度为27-28℃，通气量为1：0.5-1V/V/min条件下，培养4-6天，得一级种子培养液；二级种子培养，将一级种子培养液按重量10%加入至二级培养罐中，在温度为27-28℃，通气量为1：0.5-1V/V/min条件下，培养2-3天，得二级种子培养液；发酵培养，将二级种子培养液按重量10%加入盛有培养基的发酵罐中，在温度为26-27℃，通气量为1：0.75-1V/V/min条件下，培养2-3天，得发酵液；

（3）过滤，将发酵液利用80目滤布进行初步过滤，然后将滤取的菌丝体经离心机3000r/min离心10min进行分离，将分离的菌丝体置于密闭容器内，于4℃环境下保存备用；收集的滤液及离心液合并备用；

（4）浓缩，将上述所得滤液，经薄膜蒸发浓缩至原体积的1/20，呈糖浆状，即得食用菌发酵液。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的粪肥为鸡粪、兔粪、羊粪、牛粪、猪粪中的任意一种或两种及两种以上的任意比例混合物。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的鳌合肥为氨基酸和/或腐植酸鳌合的铁、硼、锌、铜、锰、钼鳌合物的任意一种或鳌合物混合的混合物。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的糖为单糖、双糖和/或多糖的任意一种。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的糖为葡萄糖。