[发明专利]M2型巨噬细胞外泌体在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用在审
| 申请号： | 202310073338.9 | 申请日： | 2023-02-07 |
| 公开（公告）号： | CN115998768A | 公开（公告）日： | 2023-04-25 |
| 发明（设计）人： | 张春祥;李春红;王敏睿;余烊 | 申请（专利权）人： | 西南医科大学 |
| 主分类号： | A61K35/15 | 分类号： | A61K35/15;A61K31/7105;A61P9/10;A61P9/06 |
| 代理公司： | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人： | 崔瑞迎 |
| 地址： | 646000 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | m2 巨噬细胞 外泌体 制备 治疗 心肌 缺血 灌注 损伤 药物 中的 应用 | ||
1.M2型巨噬细胞外泌体在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的M2型巨噬细胞外泌体在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用，其特征在于，所述M2型巨噬细胞外泌体用于制备治疗心肌缺血再灌注损伤造成的心律失常的药物。
3.根据权利要求1所述的M2型巨噬细胞外泌体在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用，其特征在于，所述M2型巨噬细胞外泌体通过长链非编码RNA Morrbid激活心肌细胞线粒体上的TRPV1钙离子通道，释放线粒体内超载的钙离子，调控线粒体内钙稳态，实现对缺血再灌注后心律失常的有效治疗。
4.根据权利要求1所述的M2型巨噬细胞外泌体在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用，其特征在于，所述M2型巨噬细胞外泌体提取过程为：用白细胞介素-4刺激RAW264.7细胞，利用无血清培养基孵育后收集培养基，然后通过梯度离心法分离外泌体。
5.根据权利要求4所述的M2型巨噬细胞外泌体在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用，其特征在于，所述梯度离心法分离外泌体过程为：将收集的培养基以2000g离心10min，然后以10000g离心30min以去除细胞碎片，然后，将上清液以2000g时浓缩8min至原始体积的30％，最后，将上清液120,000g离心70min，洗涤沉淀后获得M2型巨噬细胞外泌体。
6.根据权利要求5所述的M2型巨噬细胞外泌体在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用，其特征在于，用冷PBS洗涤沉淀。
7.根据权利要求4所述的M2型巨噬细胞外泌体在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用，其特征在于，无血清培养基孵育后收集培养基的过程为：无血清培养基中孵育24h，收集培养基，用新鲜的无血清培养基代替，将培养物再孵育24h，然后再次收集培养基，将收集的两体积的培养基混合在一起。
8.根据权利要求4所述的M2型巨噬细胞外泌体在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用，其特征在于，所述白细胞介素-4质量浓度为100ng/mL，所述RAW264.7细胞接种量为2.0×106个/孔。
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